1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
小麦是世界上最重要的粮食作物之一,人类所消耗的热量中有20%是由小麦提供的(fao.2011)。
随着人口增长,对小麦的需求量将会增加。
但是由于气候变化造成的环境问题,将会导致小麦产量下降(manickavelu et al.2012)。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标、内容利用ncbi上的降解组文库挖掘小麦mirna,并且通过研究它们的靶基因的变化情况,来分析它们的功能。
拟解决的关键问题(1) 鉴定mirna的靶基因。
(2) 分析靶基因的功能。
3. 研究的方法与方案
研究方法与实验方案:(1) 利用芯片数据得到66个响应赤霉病菌的小麦mirna,用psrnatarget预测它们的靶基因;(2) 利用bowtie将预测得到的靶基因比对到降解组测序文库(accession: srx493831) (http://www.ncbi.nlm. nih.gov/sra/?term=srx493831)上,对这些靶基因进行验证;(3) 通过一个python脚本,将第二步中所验证得到的靶基因与预测得到的靶基因整合到一起,进一步验证靶基因;(4) 将第(3)步得到的确定的靶基因与fhb mrna芯片探针序列进行比对,找到靶基因对应的探针,同时利用探针数据分析靶基因的功能。
技术路线:利用芯片得到66个响应赤霉病菌的mirna→psrnatarget预测靶基因→利用降解组测序文库验证靶基因→整合靶基因预测结果和降解组比对结果→确定正确的靶基因→与mrna芯片探针序列进行比对从而验证靶基因的功能可行性分析:因为降解组测序法与mirna的特点,所以降解组测序主要应用在mirna靶基因的鉴定上。
目前,已经有包括小麦在内的多种植物成功地通过这种方法挖掘出了它们mirna及其靶基因。
4. 研究创新点
目前,已有了不少将降解组测序方法应用到miRNA的挖掘及其功能分析的研究,但在小麦miRNA相关研究中,降解组测序方法的应用还较少,本次实验正是希望将这项技术应用到小麦的miRNA的挖掘中,从而增加对小麦miRNA的了解,更深入地阐明小麦的生理机制。
5. 研究计划与进展
2014年89月,阅读相关文献并进行相关实验操作培训;2014年10月2015年1月,正式进行实验研究,并进行相关实验操作培训2015年2月2015年4月,完成全部研究内容,总结,撰写文章。
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