大豆疫霉Ps55-4基因的沉默与致病性测定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

研究意义：

大豆是世界上重要的经济农作物，大豆疫霉(phytophthora sojae) 侵染大豆而引起幼苗猝死和成株的根茎腐病是大豆毁灭性病害之一（schmitthenner，1985；schmitthenner，1998；wrather，et al.，1997；郑小波，1997），全世界每年由于大豆疫霉根腐病导致的直接经济损失高达十几亿美元（tyler b m.,2002;erwin et al.,1996）。

植物对病原菌的抗性分为寄主抗病性和非寄主抗病性，非寄主抗病性是非寄主植物对病原菌在种或以上分类单元水平上的抗性，抗性稳定持久。植物病原菌产生的激发子和病原物相关分子模式(pamps)是一类重要的信号分子，可以启动不同的级联信号途径，导致过敏反应(hr)，诱发植物产生非寄主广谱抗性，同时还能使寄主产生系统获得性抗性 (thomma et al.,2011)。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：

1）有效的利用peg介导的原生质体转化和real-time pcr技术，获得大豆疫霉ps55-4的稳定沉默转化子；

2）通过游动孢子接种大豆黄化苗等实验进行致病性测验。

3. 研究的方法与方案

研究方法：

利用peg/cacl₂介导的原生质体转化技术对大豆疫霉ps55-4进行稳定沉默，筛选出沉默转化子。利用黄化苗接种等方法测定其致病性。

技术路线：

4. 研究创新点

本研究利用基因沉默方法对大豆疫霉激发子Ps55-4的致病性进行研究，进一步分析激发子的作用机制和其毒性机理。

5. 研究计划与进展

2013年08月2013年09月： 针对大豆疫霉ps55-4设计克隆和rt-pcr的上下

引物，进行基因扩增；构建ps55-4转化载体。

2013年09月2013年10月： 稳定转化筛选获得沉默转化子。