1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
研究意义:
大豆花叶病毒(soybeanmosaicvirus,smv)病是全球最主要的大豆病害之一,分布十分广泛,大豆种植区几乎都有发生。smv属于马铃薯y病毒属(potyvirus),大豆感染smv后,会造成大豆叶片的光合面积减少和光合能力降低,植株矮化,生长量下降,籽粒出现褐斑,造成大豆减产15%-35%,甚至绝收。传统的抗病育种依赖于高强度的抗侵染基因,但由于smv存在株系分化,寄主对smv各个株系的抗性具有专化性,且大豆花叶病毒在自然条件下也会发生变异,因此传统方法培育的抗病品种抗谱较窄且抗性容易丧失。
现状分析:
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:1.构建大豆花叶病毒hc-pro基因的rnai载体
研究内容:
1.利用对国内外不同smv流行株系hc-pro基因的核苷酸序列进行比克隆出的保守片段,采用gateway技术快速构建含有内含子的rnai载体。
3. 研究的方法与方案
研究方法:
1.gateway技术快速构建rnai载体
入门载体pdonr221、终端载体pb7gwiwg2(ii)在大肠杆菌db3.1菌株中扩繁后提取质粒,-20℃保存备用。
4. 研究创新点
特色或创新之处
在抗病毒作物的培育中,利用病毒自身的基因片段构建成干扰载体比抗病基因或是CP基因所构建的表达载体对病毒更加具有针对性。本研究选取的HC-Pro基因是首个被鉴定的PTGS抑制子,在SMV生活史中起着重要作用,通过利用对国内外不同SMV流行株系HC-Pro基因的核苷酸序列进行比克隆出的保守片段,来构建含有内含子的RNAi载体,将为利用转基因手段培育对大豆花叶病毒具有持久、广谱抗性的大豆新种质提供了基础材料,对大豆花叶病毒的防治有着现实的意义。
5. 研究计划与进展
研究计划:
2013.07-2013.08
大量阅读国内外转基因相关文献,熟悉试验流程以及实验室个中仪器设备的操作要
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