黄瓜内生细菌的鉴定和生防特性初探开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

植物内生菌(endophyte)是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的真菌或细菌，既可以产生各种化学物质，又可以通过竞争或其他作用来抑制杀死各种致病菌，因此在农业生产中作为一种生物农药具有广泛应用前景。其中，内生细菌是植物体自然生态系统成员，是微生态系统的天然组成成分，作为生防微生物效果显著。利用有益的植物内生细菌作用于植物微生态系统，进行微生态调控，可达到抗病、促进植物生长的目的。

植物内生细菌的应用首先要筛选出植物内生细菌拮抗菌株。国内在棉花、水稻、番茄、辣椒、花生、小麦、烟草、甘蔗、马铃薯、黄瓜等作物中分离到内生细菌并作了相关研究，目前已经筛选出了许多具有拮抗作用的内生细菌菌株，主要有芽孢杆菌属(bacillus)、单胞杆菌(pseudomonas)、短小杆菌(curtobacterium)、肠杆菌(enterbacter)、欧文氏菌属(erwinia)等。在针对黄瓜内生细菌的研究中，有针对具体的病害筛选出相应的拮抗细菌，如苗则彦等从黄瓜内生微生物资源中，筛选出具有抗黄瓜枯萎病[fusarium oxysporum (sshl.) f.sp.cucumerinum owen]和促进植物生长的黄瓜内生细菌e1、e2、e3和e4；亦有内生细菌的生防特性研究，如芦云等在新疆设施栽培黄瓜内生细菌的研究中，对黄瓜内生细菌的菌群组成和菌群密度进行了研究，为寻找瓜类病害的生物拮抗因子奠定了基础。国内外关于黄瓜内生细菌的生防特性方面的研究报道较少，故具有极大的开发潜力和研究价值。

在目前的研究报道中，发现内生菌具有多种生物学功能，能产生多种生物活性物质，对防治细菌病害、真菌病害、病毒病害和昆虫病害都有一定的作用。开发应用植物内生细菌作为生防细菌，能解决现今农药带来的诸多问题，减少农药和化肥的使用量，还能保持农田微生态系统的多样性，维持农田生态平衡，促进农作物生长，提高农作物产量及实现农业可持续发展。因此，利用植物内生细菌进行生物防治是一项经济、有效、可持续的绿色无污染的技术，其发展前景非常广阔。

2. 研究的基本内容和问题

本研究以一种黄瓜上分离出的内生细菌为研究对象，通过16s rdna基因测序对其进行鉴定，并进一步研究该内生菌对作物的生长影响，以及对几类重要病原真菌的拮抗作用，以期在生产实践中利用该内生细菌进行生物防治提供依据。

主要的研究内容包括：

一、16s rdna基因测序鉴定该未知内生细菌

3. 研究的方法与方案

一、研究方法：

1、鉴定：16s rdna测序

2、拮抗试验：平板对峙法

4. 研究创新点

本研究中利用黄瓜内生细菌发酵上清液处理不同作物种子，以探究该内生细菌对作物的影响。其中对空心菜、辣椒、番茄种子进行处理所做的研究属于国内首次。

本研究还进行了该内生细菌最优培养基的筛选，得到了该内生细菌最优培养基的最终的配方，属于首次创新的研究。

5. 研究计划与进展

2013年8月第一周

学习并熟练相关实验的基本操作技能，了解理论背景

2013年8月第二、三周