油菜BnFLA(类成束蛋白阿拉伯半乳聚糖蛋白)基因的克隆与表达分析开题报告

 2023-02-13 09:02

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)

广泛分布于植物界的各种组织和细胞中的阿拉伯半乳聚糖蛋白(agps), 属于富羟脯氨酸糖蛋白家族中的一员,是一种结构复杂的大分子[1][2]。已有的研究表明, agps基因以扩散生长(difuse expansion)和顶端生长(tip growth)两种基本的方式参与植物细胞的生长[3],其功能主要体现在其与细胞壁、质膜和细胞骨架成分的相互作用上[4]。agps主要位于细胞质质膜的外侧,高密度的agps可能有助于形成周质多糖蛋白复合物网状结构[5],从而有助于细胞的扩展,但关于agps与质膜的相互作用仍然还不清楚。本课题要研究的类成束蛋白agps(flas),就是agps中的一类,目前在拟南芥、水稻、小麦、杨树、火炬松和百日菊中已经鉴定出大量的编码fla蛋白的基因[6][7][8][9],并对这些基因的研究主要集中在基因的分离、鉴定和表达特性分析方面,但对其具体功能尚不明确。在对拟南芥一个突变体生长在高盐培养时,表现出根尖膨胀、根的伸长受到了抑制,测序结果显示突变位点位于该基因内的fasciclin-like结构域中,证明fla4是细胞扩展所必需的[10]。此外,有研究提出fla蛋白也可能会在细胞伸长、次生壁成熟的过程中起作用,从而在控制植株株高性状上有所贡献。

本课题旨在通过对油菜bnfla基因的克隆及表达分析,研究矮杆突变油菜品种及其诱变亲本中该基因的表达变化,进而为研究该基因在株高调控及生长发育中的功能奠定基础。

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2. 研究的基本内容和问题

研究的目标、内容和拟解决的关键问题

研究目标

研究矮秆突变体m176和其诱变亲本nj7982中bnfla基因的表达变化,进而为研究该基因在株高调控及生长发育中的功能奠定基础。

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3. 研究的方法与方案

研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

研究方法:

1.试验材料:试验所用材料为南京农业大学农学院油菜组通过ems诱变选育的甘蓝型

油菜矮秆突变体m176和其诱变亲本nj7982,种植在南京农业大学江浦试验田。

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4. 研究创新点

特色或创新之处

目前国内外尚无油菜BnFLA基因在植物生长发育调节中具体功能的研究报导,本课题通过研究该基因在甘蓝型油菜矮秆突变体M176和其诱变亲本NJ7982中的表达差异,对该基因的表达模式进行分析,从而为后续该基因功能的研究奠定基础。

5. 研究计划与进展

研究计划及预期进展

2014年1月-2014年2月:设计引物,克隆基因;

2014年2月-2014年3月:材料rna的提取,cdna合成,rt-pcr引物设计(中期报告);

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