HPLC法检测止咳平喘胶囊中非法掺加化学药品开题报告

1. 研究目的与意义

本课题主要采用高效液相色谱法对止咳平喘胶囊中非法添加的化学成分进行定性检查。

中成药与化学药品相比，疗效慢，成分复杂，而化学药品则高效单一，所以这就造成了一些不法商家为了获利在中成药中添加化学药品，对社会发展和消费者造成了严重的影响。

采用高效液相色谱法认定止咳平喘胶囊类中成药中添加的化学物质，快速、灵敏、准确，能够定性未知成分，从而检查出药物中非法添加的成分，避免非法药物流入市场。

2. 文献综述

中成药中化学药物的非法添加周梦燕摘 要 本文主要论述了中成药中化学药物的非法添加。首先，讲述了中成药非法添加化学药品的产生原因以及危害；然后讲述了六大类非法添加的药物：安神类、抗风湿类、降糖类、补肾壮阳类、止咳平喘类、降压类；接着，写明了非法添加化学药物的检测方法：薄层色谱法、高效液相色谱法以及液质联用法；最后列举了两类非法添加化学药物的高效液相检测方法。中成药中化学药物的非法添加严重危害消费者权益以及身体健康，建立完全的非法添加检测系统是十分之有必要的。

关键词 中成药；非法添加；化学药物；检测方法

中药是中国传统中医特有药物，是我国传统的医学宝藏，在民间普遍认为中药能治本且无毒副作用。中成药则为中药中的一部分，以中草药为原料，经制剂加工制成各种不同剂型的中药制品。现在，在我国，普遍存在不法商家在中成药中非法添加化学药物的现象，以牟取暴利，这种行为是欺骗消费者的严重违法行为。1．中成药非法添加化学药品的原因和危害1.1中成药非法添加化学药品的原因中成药组成成分复杂，疗效较慢，而化学药品成分单一且见效快，并且化学药品添加到中成药中隐蔽性强，添加的成分和数量具有不确定性和单一性，药品质量标准不可能做到全成分检测，容易逃过质量监测部门的检查。巨额暴利是诱导不法商家进行非法添加化学药品的中成药生产的直接因素，经济效益推动不法行为的进行。另外，专业人员的高科技技术介入是导致非法添加的另一重要因素。1.2中成药非法添加化学药品的危害1.2.1化学药物本身的危害一些非法添加的化学药物患者在服用之后会产生一定的毒副作用，需在医生指导下进行药物的服用。中成药中非法添加的化学药物有很多的危害，例如：止咳平喘中成药中添加的醋酸泼尼松、氨茶碱、磺胺类药物，会产生心脏毒性反应、肾上腺皮质功能减退、糖尿病、高血压病、骨质疏松以及免疫功能下降等；降糖类中成药中添加的苯乙双胍、格列吡嗪、格列本脲，以低血糖反应最为常见，其他有神经系统损害、变态反应、胃肠道反应、口腔出血等[1]。诸如此类的不良反应有很多，所以患者在服用非法添加的中成药后产生各种肝功能失常，过敏反应等也是在情理之中。1.2.2中草药与化学药物的相互作用中草药能够与化学药物联合作用，通过对药物代谢酶进行调节，或者改变其药动学、药效学，进而导致不良反应的发生[2]。1.2.3剂量问题化学药物的安全有效性是在规定剂量内而言的，所以不能因为安全有效就随意添加使用。例如阿司匹林禁用于有出血症状的溃疡病、血小板减少症。患有肝、肾功能损害或溃疡病者慎用。中成药在使用时不可以忽视化学添加药物的存在，更不能加大剂量和长期使用[3]。1.2.4药品包装说明书上未标明是否添加化学药物药品包装说明书上未标明是否添加化学药物，以及添加化学药物种类，这样标准难以控制，为质检部门进行质控带来不便；此外，在患者的认知中中药及中成药不会对身体带来危害，可以随意添加剂量或是增加用药次数；而且，由于不知道成分，在产生副反应或是其他不良反应之后无法获得及时的治疗。2.非法添加化学药物的中成药类别[4]2.1安神类安神类中成药中非法添加的化学药物有苯巴比妥、氯氮艹卓 、艾司唑仑、劳拉西泮、阿普唑仑、佐匹克隆、地西泮、氯硝西泮等。2.2抗风湿类抗风湿类中成药中非法添加的化学药物，按结构和作用机制分为非甾体抗炎类和甾体抗炎类，非甾体抗炎类又分为甲酸类、乙酸类、丙酸类、昔康类。化学药物主要有双氯酚酸钠、萘普生、吲哚美辛、醋酸泼尼松、吡罗昔康、双氯芬酸盐、尼美舒利等。2.3降糖类降糖类非法添加的化学成分主要有四大类双胍类、磺脲类、噻唑烷酮类、格列奈类。2.4补肾壮阳类补肾壮阳类非法添加的化学药物有枸橼酸西地那非、枸橼酸他达那非等。2.5止咳平喘类常见的化学添加药物有茶碱、磺胺甲噁唑、醋酸泼尼松、地西泮等。2.6降压类常添加的化学药物有二氢吡啶类如硝苯地平和生物碱类( 包括利血平、哌唑嗪、阿替洛尔、厄贝沙坦和卡托普利) 等。3.中成药中非法添加化学药物的检测方法3.1薄层色谱法（tlc）[5]绝大部分中成药中非法添加化学药物都以薄层色谱作为快速筛查的方法，其特点是简单、经济、易行。然而由于中成药成分复杂，从而斑点较多，相互干扰严重，易导致假阳性，所以对每种被可疑添加的中成药一般都需要反复摸索展开条件，以达到较好的分类。不同种类的中成药识别非法添加物几乎都用到了薄层色谱法作为初筛方法。3.2高效液相色谱法（hplc）[5] ～ [6]高效液相色谱法分离能力强，可配置不同的检测器，对薄层色谱法检测后显阳性的样品需要进一步用高效液相色谱法验证。在用高效液相色谱法检测时,要注意供试样品的预处理；中成药成分复杂，多含有易损害色谱柱的大分子物质。此法通过比较样品和对照品色谱峰的保留时间和紫外吸光度。若出现保留时间一致的色谱峰，应该进一步比较该色谱峰与对照品峰的紫外光谱图是否一致。采用高效液相色谱技术时常用二极管阵列检测器。3.3液质联用法[7]由于同时结合了hplc技术的高分离能力与质谱（ms）较高的灵敏度与较强的定性能力等优点，hplc/ms技术能够对检测目标进行准确地定性、定量，可以在一次运行中同时完成筛选和确证。利用该方法不需要经过复杂的前期处理，且抗干扰能力强，灵敏度高，重现性好，是目前中成药中非法添加化学成分最有力的分析手段。4.非法添加化学药物的高效液相色谱法检测方法（举例）4.1醋酸泼尼松、茶碱 [8]（止咳类） 参照2005 年版《中国药典( 二部) 》的色谱条件及相关资料，分别选用240 nm 和275 nm 作为醋酸泼尼松和茶碱的检测波长，以甲醇－水为流动相，通过反复调整流动相比例，结果以甲醇－水( 55 ∶ 45) 为流动相时，醋酸泼尼松保留时间适中，能排除样品中各成分的干扰，而茶碱保留时间较短，很多杂质也在几分中内出峰，各峰无法分开。通过调整流动相比例，适当延长茶碱的出峰时间，以甲醇－水( 20 ∶ 80) 为流动相时，茶碱保留时间适中，能排除样品中各成分的干扰，峰形对称。4.2格列吡嗪、甲苯磺丁、格列齐、格列本、格列美、格列喹酮[9]（降糖类） 最后确定的检测条件为：检测波长225nm；以甲醇为提取溶剂、超声提取20 min；梯度洗脱。综上所述，根据国家发行的药品检验标准以及实行的情况，再根据中成药非法添加的现状，可有以下建议：扩大标准的适用范围；增加不同类别的使用方法；加快对照品的研制；执法过程确定口服剂量[10]。这样才能确保患者的用药安全。

3. 设计方案和技术路线

由于商家的非法添加，某种药可能会添加其他非此类药物疗效的化学药品。

1、利用薄层色谱法对样品进行快速筛查。

先用止咳平喘的对照品进行薄层筛查，若含有止咳平喘类化学药物，则再进行高效液相进一步认定，之后再做液-质联用。

4. 工作计划

14周，对单位各种仪器进行初步熟悉，其中重点熟练掌握薄层色谱法及高效液相色谱法。

58周，对老师给的课题进行文献查阅，并整理。

910周，根据文献，利用薄层色谱对样品进行快速筛查，确定样品中含有的非法化学药物为何类。

5. 难点与创新点

本法首先采用薄层色谱法进行快速筛查，前处理简单、样品用量少、方便、灵敏；然后利用高效液相色谱法进一步定性，分离性能好、简便、快速、高分辨能力、检测成本低；最后再用液-质联用做最后的确定。

三法联用，提高了检测的准确性。

其中，高效液相色谱法，中成药品检验常用检测器为紫外检测器，而非法添加通用检测器为二极管阵列检测器( dad) ，该检测器对于鉴定非法添加的化学药物有较高准确度，并可进行定量测定。