聚氨酯水解酶基因(CpCut2)的克隆、表达及其酶学性质分析开题报告

 2023-04-18 09:04

1. 研究目的与意义(文献综述包含参考文献)

文 献 综 述研究背景及意义1.1研究背景聚氨酯(polyurethane,pu),全称为聚氨基甲酸酯。

1937年,ottobayer首次以石油化学品为原料合成了pu,并于20世纪50年代开始工业化生产[1]。

由于具备良好的机械性能、热稳定性和耐久性,pu塑料被广泛应用于保温建材、包装材料、汽车材料、合成革、鞋类材料、涂料、医用材料等。

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2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

本课题以塑料降解酶cpcut2为研究对象,构建其在大肠杆菌中的表达体系,并尝试体外表达验证其相关酶学性质,并对pu降解效果进行表征。

1) 聚氨酯降解酶的构建与表达:在cladosporium sp. p7中筛选了与降解pu有关的基因,构建到pet-22b中,在大肠杆菌中表达。

考察不同助溶标签、诱导剂(iptg 或乳糖)浓度、表达温度等参数优化的外源表达条件,实现降解酶高效可溶性表达,并通过sds-page电泳判断重组酶的可溶性表达程度。

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