华细辛CAD基因的克隆开题报告

1. 研究目的与意义

一、毕业设计的内容

1、理论知识学习与实验前期准备

根据课题实验内容，查阅植物次生代谢、分子生物学相关文献资料、摸索实验技术、搜集实验材料。

2. 文献综述

肉桂醇脱氢酶及其基因的研究进展

047111245陆丰翎

摘要：木质素是由多种简单的苯丙烷及其衍生物聚合形成的复杂聚合物，其通过有效物理化学屏障在植物抵抗病、虫害侵入中起着重要作用。^[1]而肉桂醇脱氢酶（cad）是控制木质素生物合成途径中的最后一步反应的关键酶，故探讨cad表达调控及其与组织木质化的关系具有重要的植物生理学意义。该文综述了植物cad的蛋白特征、基因分布和分类和cad基因表达与木质素合成的关系,以及基因克隆技术，为研究cad在植物生长发育和抗病中的作用提供理论指导。

3. 设计方案和技术路线

一、研究方案

（1）称取适量华细辛根和根茎材料，制备总rna。通过逆转录合成双链 cdna。

（2）根据cad基因的保守区序列，设计巢式 pcr引物，对双链 cdna进行巢式扩增。扩增产物经切胶纯化后回收，进行序列测定，即为cad基因的保守片段。

4. 工作计划

2022年1月5日 ～3月3日材料采集、文献搜集、相关实验技术的摸索

2022年3月4日～ 4月15日 总rna提取、保守序列查找、pcr、测序

2022年4月16日～4月30日 race扩增、获取基因cdna全长

5. 难点与创新点

甲基丁香酚是重要的药理活性成分和芳香工业原料，其生物合成途径尚未得到完整阐明。对一个新的生物合成途径进行研究，是一项特色与创新性较强的工作。本毕业设计参与到这样的一项研究工作之中，对甲基丁香酚生物合成途径中的一步催化反应进行解析，是整个项目的有机组成部分。