海蓬子三萜皂苷的分离与衍生化开题报告

1. 研究目的与意义

海蓬子（学名盐角草salicorniabigelovii）属藜科(chenopodiaceae)盐角属，属于肉质化真盐生植物，主要分布于亚洲、欧洲、非洲及美洲，我国仅有一种即盐角草salicorniaeuropaeal，在我国辽宁、新疆、河北、内蒙古、宁夏、山东、山西、陕西、甘肃等地均有广泛的分布。常生于盐碱地、海滩、盐碱滩涂沙地。药用具有平肝、降压、利尿的作用，主治高血压和头痛。

从海蓬子中分离出的两种三萜皂苷化合物sl-15和sl-19（结构式见图1）。bigeloviia（sl-15）是从北美海蓬子全草中提取分离得到的一类30-降齐墩果烷型三萜皂苷。应用mtt法研究发现其可不同程度的抑制人肝癌细胞hepg2(3.72μm)、人白血病细胞hl-60(2.24μm)、人乳腺癌细胞mcf-7(8.46μm)的生长。从海蓬子中提取的另外一种三萜皂苷齐墩果酸-3-o-β-d-葡萄糖基-28-o-β-d-葡萄糖醛酸苷(sl-19)的抗肿瘤活性较低。研究表明bigeloviia(sl-15)可以通过凋亡途径和破膜作用引起细胞死亡，从而起到抗肿瘤的作用。

ukiya等报道calendulaglycosidef6'-o-n-butylester(结构式见图1)除对白血病（ccrf-cem:gi50=23.1μm）、肾癌细胞（caki-1：17.2μm;uo-31：12.7μm）、乳腺癌细胞（nci/adr-res:>50μm）抑制作用一般外,对其他7个癌症类型（肺癌、结肠癌、黑色素瘤、肾癌、卵巢癌、乳腺癌、白血病）的60种肿瘤细胞的gi50值均小于10μm。sl-15是calendulaglycosidef6'-o-n-butylester的30-降三萜。

2. 文献综述

海蓬子三萜皂苷的分离及其衍生化

占晴情110205107中药资源与开发

摘要藜科隶属于石竹目，藜科共有100多属、1400多种植物。北美海蓬子(SalicorniabigeloviiTorr．)为藜科(Chenop0diaceae)北美海蓬子属(SalicorniaL．)一年生植物，生于盐碱地、盐湖旁及海边。[1-2]海蓬子别名为盐葫芦海芦笋、盐角草、、海胖子、抽筋菜等。海蓬子中含有2一羟基一6，7一亚甲二氧基异黄酮醇、2，7一二羟基一6一甲氧基异黄酮醇、苏氨酸、赖氨酸、槲皮素、缬氨酸、异亮氨酸、芸香甙等多种成分。海蓬子是有益人体的绿色保健食品。[3-5]为深入研究从海蓬子中含有的两种皂苷化合物的提取分离方法，本综述重点介绍盐角草属皂苷和30-降齐墩果烷型三萜皂苷的研究现状以及海蓬子属植物的药理活性。

关键词海蓬子；三萜皂苷；抗肿瘤

1.海蓬子属皂苷研究现状

夏郭平、刘晓峰等[6]从北美海蓬子中分离出2种新化合物，鉴定3种已知三萜皂苷化合物。

母核：

王相云[7]从盐角草中分离出新三萜皂苷化合物1种SAE-5，已知皂苷类化合物7种。

2.30-降齐墩果烷型三萜皂苷研究现状

在铁线蕨属植物中发现的两个30-降齐墩果烷型三萜化合物adiniaonol和adiantuoleanone。

三叶木通（Akebiatrifoliate)中也发现了3个30-降类型的化合物。

芍药属和雷公藤属植物均含有皂苷类化合物，在这些皂苷中发现了30-降类型的结构。

在愈疮木（Guaiacumofficinale）中发现了guaianinQ。

芍药属紫牡丹（Paeoniadelavayi）中含有23,30-二降结构的化合物。

3.海蓬子属植物的药理活性

3.1抗氧化和美白作用

Sung等[8]报道海蓬子水提物具有抗氧化和美白作用，它可使人皮肤纤维细胞免受叔丁基过氧化氢诱导的氧化压力，从而抑制细胞凋亡；同时海蓬子水提物能够抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素合成。

2005年，有研究者对S．herbacea的化学成分进行研究，发现1个新的绿原酸衍生物CDCQ(3-cafeoyl，4一dicaffeoylquinicacid)[9]。研究均表明CDCQ具有抗氧化活性。此外，CDCQ还能保护DNA质粒，使其免受羟基自由基诱导的DNA链断裂。2009年，Hwang[10]等发现CDCQ能够使人肝细胞免受叔丁基过氧化氢诱导的氧化压力，其作用机制为：降低叔丁基过氧化氢激活的ROS和caspsae一3；上调血红素加氧酶一1(HO一1)的表达；促Nrf2(NFE2一relatedfactor2)的核转位和PI3K／Akt的激活。

3.2抗肿瘤活性

Kong[11]等对从S．herbacea中分离得到的黄酮苷类化合物异鼠李素一3-OpD一吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin3-OpDglucopyranoside)和槲皮素一3一O一8一D一吡喃葡萄糖苷进行抗肿瘤实验。以人纤维肉瘤细胞HT1080作为细胞模型，结果发现这两种糖苷通过抑制转录因子AP一1从而抑制基质金属蛋白酶一2(MMP-2)和基质金属蛋白酶一9(MMP-9)的酶活性和蛋白水平的表达，同时增强TIMP一1蛋白水平的表达。

Ryu[12]等研究S．herbacea中的多糖对人结肠癌细胞HT一29的抗增殖活性及其机制。S．herbacea中的多糖可诱导HT一29细胞凋亡，并且能够细胞周期阻滞在G／M期。RTPCR结果表明S．herbacea中的多糖通过抑制cyclinB1和Cdc2，诱导p53和p21表达，从而抑制肿瘤细胞HT.29的增殖。

3.3抗炎活性

异鼠李素一3一OBD一吡喃葡萄糖苷能够抑制细菌脂多糖(LPS)刺激的巨噬细胞RAW264．7的炎症。异鼠李素一3一O一13-D一吡喃葡萄糖苷作用后，LPS刺激的巨噬细胞RAW264．7中一氧化氮(NO)分泌减少，诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNFd)和白介素(IL一1B)等细胞因子表达降低[13]

3.4调节免疫

研究者发现了海蓬子多糖(SPS)和y干扰素对单核细胞具有协同激活作用。SPS和干扰素能协同抑制RAW细胞的生长而诱导其转变为重度附着的巨噬细胞。此外,SPS和干扰素协同激动RAW细胞而产生TNF一、IL-1p和NO等细胞因子。当SPS含量较低时，协同激活作用更明显[14]。

3.5降糖降血脂作用

2012年，Kong[15]等报道异鼠李素一3一OBD一葡萄糖苷还可以用来预防肥胖及其相关性疾病。其作用机制是：异鼠李素一3一O一8一D一葡萄糖苷激活蛋白激酶AMPK，从而阻断脂肪聚集、抑制前脂肪细胞3T3一L1分化。

综上所述，，盐角草属植物的黄酮类化合物)具有抗肿瘤、抗氧化、调节免疫、抗炎等作用，从而对各系统、器官等发挥药理作用。其多糖可抗炎。抗肿瘤及调节免疫。研究发现从盐角草属植物中提取的多种皂苷成分具有很好的抗肿瘤作用，，深入探讨盐角草属植物海蓬子内皂苷的提取与分离方法可为其在药理学的应用提供一定的理论依据。

参考文献

[1].吕忠进，GLENNE，HODGESR．全海水灌溉的作物一北美海蓬子(上)[J].世界农业，2001，(2)：14-14

[2].GLEENEP，OLEARYJW，WATSONMC，eta1．SalicorniabigeloviiTon'：anoilseedhalophyteforseawaterirrigation[J]．Science，1991，4997(251)：1065-106

[3].赵文红，赵翱，白卫东等．柿叶黄酮化合物提取工艺研究[J]．陕西科技大学学报2007,25(5)：54．

[4].魏成金，尹金来，徐阳春．不同氮磷水平对北关海莲子生长和品质的影响[J].南京农业大学学报2006,29(4)：59．

[5].张海悦，王黎兵，郭新力．狭叶荨麻总黄酮的测定[J]．食品科技，2007，12：181．

[6].夏郭平，冯煦，陈雨，王鸣，董云发，北美盐角草化学成分的研究，江苏省药用植物研究开发中心，天然产物研究与开发，2010,22；1012-1014

[7].王相云，冯煦，王鸣，陈雨，董云发，赵友谊，孙浩，盐角草化学成分研究，中药材，2011，Vol.34,No.1

[8].SungJH,ParkSH，SeoDH，eta1．AntioxidativeandskinwhieningeffectofanaqueousextractofSalicorniaherbacea[J]．BiosciBiotechnolBiochem，2009，73(3)：5526．

[9].ChungYC，ChunHK，YangJY，eta1．Tungtungmadieacid，anovelantioxidant，fromSalicorniaherbacea[J]．Arch口mRes，2005，28(10)：11226．

[10].HwangYP，YunHJ，ChunHK，eta1．Protectivemechanismsof3-caffeoyl4-dihydrocaffeoylquinicacidfromSalicorniaherbaceaagainsttertbutylhydroperoxide-inducedoxidativedamage[J]．ChemBioZInteract，2009，181：36676．

[11].KongCS，KimYA，KimMM，eta1．FlavonoidglycosidesisolatedfromSalicorniaherbaceainhibitmatrixmetalloproteinaseinHT1080cells[J]．ToxieolInVitro，2008，22：17428．

[12].RyuDS，KimSH，LeeDS．Anti-proliferativeeffectofpolysaccharidesfromSalicorniaherbaceaoninductionofG2／Marrestandapoptosisinhumancoloncancercells[J]．JMicrobiolBiotechnol，2009，19(11)：14829．

[13].WangQz，LiuXF，ShahY，eta1．TwonewnortriterpenoidsaponinsfromSalicomiabigeloviiTortandtheircytotoxicactivity[J]．Fitoterapia，2012，83：7429．

[14].ImSA，LeeYR，LeeYH，eta1．SynergisticactivationofmonocytesbypolysaceharidesisolatedfromSalicorniaherbaceaandinterferon-[J]．JEthnopharmacol，2007，111(2)：36570．

[15].KongCS，SeoY．Antiadipogenicactivityofisohamnetin3-0-BDglucopyranosidefromSalicorniaherbacea[J]．ImmunopharmacolImmunotoxicof，2012，34(6)：90711．

3. 设计方案和技术路线

合并所有含有目标物的样品，置反相柱内，使用不同浓度的乙醇水溶液（其水中含有1%乙酸）进行洗脱，用小瓶收集洗脱液，并编号。使用玻璃毛细管吸取洗脱液进行点样，在BAW展开剂中进行显色。将结果与标准品比较，将含有SL-19的洗脱液进行HPLC。浓度较高者使用旋转蒸发器旋干并收集。浓度较低者按以上步骤继续使用不同浓度的乙醇水溶液洗脱并编号后重复以上所有操作浓度较高者使用旋转蒸发器旋干并收集。

4. 工作计划

2022年1月2022年2月文献查阅，资料汇总

2022年2月2022年3月按提取路线提取sl-19

2022年3月2022年5月sl-19衍生化

5. 难点与创新点

（1）采用高效液相色谱和反向色谱相结合的方法分离和纯化海蓬子；

（2）初步阐明了海蓬子属植物的药理活性。