来源于Ideonella sakaiensis的塑料降解酶（PETase）在大肠杆菌中的高效表达及其活性鉴定开题报告

1. 研究目的与意义（文献综述包含参考文献）

pet回收的研究进展及评价摘要：pet污染是当下亟待解决的一大污染难题，由于pet材料的广泛运用和不可生物降解的特性性而使大量塑料沉积在环境中，现已在土壤和海洋中造成了巨大的浪费和污染。

pet的回收总共分四大类，在早期化学分解技术还不太成熟时，多用二次机械回收或直接焚烧来处理环境中的塑料垃圾。

但随着科技的发展，生物降解法作为一种环境友好型的方法逐渐受到关注。

2. 研究的基本内容、问题解决措施及方案

1、 主攻方向论文以前人的研究为基础，筛选出多种信号肽与petase融合构建载体，实现其在大肠杆菌中的可溶性表达，在纯化目的蛋白后验证其酶活性，总目的是提高petase在大肠杆菌中的分泌量和分泌出来的活性。

2、 主要解决的问题本文将介绍通过优化后的基因通过诱导表达后产率和活性等情况，探究信号肽ompa、pelb、male与petase融合构建重组表达载体经转化后的的分泌效果，摸索高效表达条件的优化以及纯化条件，同时对酶活进行测定。

通过pcr、感受态转化及诱导、纯化等技术得到目的蛋白，通过改变诱导剂剂量或培养环境等探究最适表达条件，统计整理相关数据并进行理论分析。