水生昆虫蝎蝽内生真菌次级代谢产物的研究开题报告

1. 研究目的与意义

研究内容：本课题前期从盐城所采集的昆虫蝎蝽中培养纯化出三株代谢产物较好的真菌，并选择其中一株xc-3对其进行培养条件优化：pda,cs,me,md等培养基以及不同的培养温度，摇床转速等，最终以md培养基大发酵40l，发酵液用乙酸乙酯进行萃取。

采用各种色谱手段（硅胶柱，反相ods柱，sephadexlh-20柱，薄层色谱和hplc等)对其总浸膏进行分离；采用现代波谱技术(1h-nmr,13c-nmr, 2d-nmr, hr-esi-ms等)和各种化学方法对分离得到的单体化合物进行结构鉴定；并进行不同模型（抗炎、抗菌、细胞毒等）的药理活性筛选。

研究意义：共生菌是一类长期与宿主共同生存的特殊环境微生物，包括细胞外共生菌与细胞内共生菌。

2. 文献综述

昆虫共生菌次级代谢产物的研究进展仇云霞摘要：昆虫共生菌是长期与昆虫共同进化的微生物，其种类繁多。

次级代谢产物结构类型多样，有生物碱类、醌酮类、多肽类、萜类、内酯类及其他类型等，生物活性广泛如抗菌、抗癌和免疫调节等活性，为人们发现新型先导化合物提供了物质基础。

本文以昆虫共生菌的代谢产物为出发点，对其药用活性成分进行综述，旨在为今后昆虫共生菌的代谢产物进一步研究提供理论指导 。

3. 设计方案和技术路线

研究方案：1. 发酵从蝎蝽中分离得到一株真菌xc-3,用md培养基进行发酵，28℃条件下培养10天。

2.提取过滤发酵液，用乙酸乙酯萃取；菌丝体晾干后用甲醇超声提取。

3.分离采用各种色谱方法（硅胶柱色谱、反相ods柱，sephadexlh-20柱，薄层色谱和hplc等）对乙酸乙酯萃取所得浸膏及菌丝体提取物总浸膏进行系统性分离。

4. 工作计划

2022.01：文献研究、综述撰写、实验方案设计（已完成）2022.02-2022.03：实验开始，从蝎蝽中得到三株真菌，将其中一株真菌xc-3进行发酵，md培养基摇床发酵，28℃培养10天。

纱布过滤收取菌液，得到螅蝽发酵液40l,浓缩至3l,并用乙酸乙酯按1：1萃取五遍，并将萃取液浓缩，得到15g总浸膏。

(已完成）2022.03-2022.04：利用各种色谱柱，对总浸膏进行分离。

5. 难点与创新点

已有的昆虫内生菌代谢产物研究主要针对陆地昆虫与海洋昆虫，对水生肉食性昆虫关注较少，其特殊的生活环境及捕食特性可能会为其带来独特的内生真菌与代谢产物，这是该选题的一大特色与亮点。