甘草组织培养及同源四倍体诱导初步鉴定开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1 本课题意义 甘草又名国老、灵通、甜草、棒草，为豆科植物甘草 glycyrrhiza uralensis fisch.（也称乌拉尔甘草）、胀果甘草 glycyrrhiza inflata bat. 或光果甘草glycyrrhiza glabra l. 的干燥根及根茎（中国药典，2015）。

春秋二季采挖，除去须根，晒干。

其性味甘平，归心、肺、脾、胃经，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功效；主要用于脾胃虚弱、倦怠乏力、心悸气短、咳嗽痰多、脘腹和四肢挛急疼痛、痈肿疮毒、缓解性和烈性。

2. 研究的基本内容和问题

1 研究目标 通过不同浓度的秋水仙素跟不同的诱导时间之间的组合，研究出能有效提高乌拉尔甘草四倍体诱导率的最佳组合，并诱导鉴定出四倍体乌拉尔甘草植株。

2 研究内容 2.16-ba浓度与naa浓度的不同组合对乌拉尔甘草茎段的分蘖以及生长发育的影响配制不同6-ba与naa浓度比例的培养基，将乌拉尔甘草植株切成2-3cm小段进行组织培养。

每隔5d观察并记录组培苗的生长状况。

3. 研究的方法与方案

1 研究方法及实验方案1.1 查阅大量文献，确定种子萌发需要的条件、增殖培养基所用到的激素种类、诱导一般用到的秋水仙素浓度等。

1.2 增殖所用激素有6-ba与naa，配制2.0mg/ml 6-ba 0.1mg/ml naa、1.0mg/ml 6-ba 0.1mg/ml naa、0.5mg/ml 6-ba 0.1mg/ml naa三种不同组合的增值培养基各1l，每种培养基接种20-30棵无菌苗，接种后每隔3-5d观察并记录植株生长情况与分蘖数，并由此筛选出增值效果最佳的增值培养基。

1.3 配制0.05%、0.1%、0.2%三种浓度的秋水仙素，分别诱导12h、24h、36h、48h，诱导后接种在ms培养基中，每隔3-5d观察植物的长势与生根情况，并记录。

4. 研究创新点

本实验着重在于诱导甘草的四倍体植株，将秋水仙素进行高压灭菌，无菌操作进行诱导，诣在诱导出纯四倍体植株，野生抚育后能够达到工业化生产，从而为工业化大量提取甘草甜素、甘草素、甘草黄铜类化合物提供优质的原材料。

5. 研究计划与进展

本实验预计在2017年3月1日-2018年5月1日完成：（1）2017年3月1日-2017年3月15日收集有关资料，整理文献。

（2）2017年3月15日-2017年4月15日做甘草种子萌发实验并记录数据。

（3）2017年4月15日-2017年7月1日扩繁组培苗，观察植物生长状态并记录数据。