基于microRNA分析的马兜铃酸I肾毒性机制研究开题报告

1. 研究目的与意义

实验将动物分为三组，以便比较不同剂量药物引起的病症并说明马兜铃酸的肾毒性作用，给大鼠腹腔注射药物14d后，通过分析经马兜铃给药的大鼠血清指标，研究马兜铃酸i肾毒性机制，其中指标包括肌酐和尿素氮，当急、慢性肾小球肾炎等使肾小球滤过功能减退时，血肌酐可升高。

同时应在已知内生肌酐清降率的基础上穿插着测定血肌酐值作为追踪观察的指标。

尿素氮与肌酐值同时测定更有意义，如二者同时升高，说明肾脏有严损害。

2. 文献综述

马兜铃酸的毒性研究进展陈蔚（南京中医药大学药学院　江苏　南京　210046)摘要我国马兜铃属(aristofochia)植物药,除1990年版中国药典所载马兜铃、天仙藤、青木香、关木通和广防己以外,还有民间习用的朱砂莲、汉中防己、寻骨风,均含抗癌活性成分马兜铃酸工及此类(葫基菲类有机酸)衍生物或内配胺成分。

马兜铃酸属于硝基菲类化合物,广泛存在于马兜铃属中药中,具有肾毒性和潜在的致癌作用。

本文对马兜铃酸的毒性作用以及细胞分子毒性机制进行了综述,并对可能的减毒方法进行了探讨。

3. 设计方案和技术路线

研究方案体内实验：（１）大鼠27只，分为三组，对照组，低剂量组2.25mg/kg，高剂量组9mg/kg，1次/d，腹腔注射14d，处死，取血清做microrna分析；检测生化指标肌酐cr,尿素氮bun；肾组织冻存，做he病理染色，置于10％中性甲醛溶液固定24h,然后进行常规脱水、透明、石蜡包埋、切片(3m)。

切片经染色后在显微镜下进行肾脏组织形态学观察，分别记录肾小球病理变化、肾小管坏死面积比(％)等数据。

（２）根据microrna分析结果，找出有明显差异变化的microrna，做pcr验证；并做go分析，pathway分析。

4. 工作计划

2022.1.15-2022.2.15文献检索与查阅2022.2.15-2022.2.28初步确立课题目标2022.3.01-2022.3.13开题报告和综述的撰写2022.3.14-2022.3.15实验准备2022.3.15-2022.3.28大鼠腹腔注射给药2022.3.29-2022.5.14按照方案进行实验2022.15.-2022.06.08实验数据分析整理，完成论文

5. 难点与创新点

利用最新的microRNA芯片等高通量的技术手段对对miRNA和疾病之间的关系进行研究，将会使人们对于高等真核生物基因表达调控的网络理解提高到一个新水平,为进一步寻找干预靶点提供依据。

基于microRNA的分析研究为马兜铃酸肾毒性机制的进一步研究提供了新的平台。