SFN对小鼠卵泡颗粒细胞增殖、功能以及组蛋白乙酰化修饰的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

（一）研究意义

萝卜硫素 (sulforaphane)是从十字花科蔬菜如西兰花中分离出来的具有化学预防作用的植物活性物质，是目前为止蔬菜中发现的抗癌效果最好的天然诱导剂。大量研究报道表明，在日常膳食中添加十字花科属的蔬菜比如甘蓝等，可以有效地降低包括前列腺癌、肠癌、肺癌等许多常见癌症的风险。此外，萝卜硫素还被发现能抑制多种机体炎症反应^[1]。

另一方面，vallejo等人研究发现sfn能够抑制癌细胞无限增殖，诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞，不能从一个阶段很好地进入下一个阶段，同时还具有预防癌细胞转移、抗氧化、抗炎等多种作用^[2，3]，因此萝卜硫素可以认为是十字花科蔬菜中一种最强的抗癌成分，而对于萝卜硫素的生理功能和机制的研究已经成为当前比较热点的研究之一。但是，snf对卵泡颗粒细胞的表观遗传修饰起到了什么作用，却很少有人问津。事实上，目前国内外对于snf的作用机制研究还存在一些不足之处，对于卵泡颗粒细胞的表观遗传修饰中snf的作用机制缺乏深入的认识。

2. 研究的基本内容和问题

一）研究目标

snf对小鼠卵泡颗粒细胞表观遗传修饰的影响

（二）研究内容

3. 研究的方法与方案

（一）研究方法

我们首先用萝卜硫素处理小鼠或者猪的颗粒细胞，目前的研究发现萝卜硫素促进颗粒细胞增殖，用实时荧光定量pcr ，western blot等技术检测颗粒细胞增殖标记基因，并且用cck-8和edu，细胞计数等技术检测细胞增殖表型的变化。然后下一步用rna测序，检测某些关键基因在颗粒细胞增殖中发挥的重要作用，然后通过chip-qpcr或者chip-seq来检测启动子区表观修饰水平，同时检测全局的组蛋白乙酰化水平。

（二）技术路线

4. 研究创新点

目前国内外关于萝卜硫素的作用机制的研究还有不足，而对于卵泡颗粒细胞表观遗传修饰的调控研究相对较少，所以萝卜硫素在哺乳动物生殖系统上发挥的作用还不清楚。

我们目前的研究表明，萝卜硫素可以作为组蛋白去乙酰化酶的抑制剂，促使组蛋白乙酰化水平升高；同时还是DNA甲基转移酶的抑制剂，可以造成DNA甲基化水平的降低。我们通过对小鼠灌胃SNF后检测FSHR及LHR蛋白表达水平是否发生改变，同时检测基因启动子区乙酰化和甲基化修饰水平，并观察卵泡发育状况的改变，从而尝试着调控母鼠的繁殖性能，为动物育种和繁殖调控的研究提供理论依据，具有非常重要的研究意义。

5. 研究计划与进展

（一）研究计划

（1）确定课题内容及名称。

（2）收集资料，查阅文献资料，自主学习分析文献并了解snf的作用机制和卵泡颗粒细胞的表观遗传修饰。