乳果糖-凝结芽孢杆菌合生素替代金霉素对断奶仔猪生产性能和血液指标的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

一、本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）

1.课题背景及意义

仔猪出生后，由于消化、免疫等生理功能未发育完善，易受恶劣环境和饲养管理不当的影响而产生各种各样疾病。母猪分泌的乳汁中含有较多免疫物质和生长因子，这对仔猪生长至关重要，在养猪生产中已广泛使用早期断奶技术。断奶对于仔猪而言涉及饮食、混群、生存空间等各方面的改变，这些改变将造成仔猪精神、生理和环境等应激，极易引发断奶仔猪应激综合征，导致仔猪出现食欲下降、生长缓慢甚至倒扣、免疫功能低下、肠道微生物区系改变、腹泻等一系列问题，严重威胁到后期养殖事业的经济利益。因此，避免断奶应激对仔猪产生的不良影响，运用合理的养殖技术帮助仔猪顺利度过“断奶关”对养猪生产效益具有重要意义。抗生素因具有抗病毒病菌、减少应激、促生长等功能，曾被广泛用于畜牧养殖业。但长期过度使用或滥用抗生素会引发药物残留、病菌耐药性增强、畜禽免疫力下降等危害，甚至影响自然环境和人类健康。

2. 研究的基本内容和问题

二、研究的目标、内容和拟解决的关键问题

1.课题研究的目标

本实验课题将乳果糖-凝结芽孢杆菌合生素作为断奶仔猪饲粮添加剂。通过研究乳果糖-凝结芽孢杆菌合生素对饲喂无抗日粮断奶仔猪生长和血液相关指标的影响，为禁用抗生素后寻求新的饲料添加剂提供理论依据和实验指导。

3. 研究的方法与方案

三、研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析

1.研究方法

（1）分组方法：控制变量法。试验选用27或28日龄断奶的“杜长大”三元杂交阉公猪18头，随机分成三组，每组6个重复。对照组（CTR）饲喂无抗基础日粮，抗生素组（ANT）在无抗基础日粮的基础上添加75mg·kg^-1金霉素，合生素组在无抗基础日粮的基础上添加合生素（10g·kg^-1的乳果糖和10⁹cfu·kg^-1的凝结芽孢杆菌）。

（2）试验指标的收集与测定：

① 生长性能：试验期间准确记录每天每栏的采食量，正式试验期内第0、7、14、21、28天对仔猪进行空腹称重，最后计算期间（0-28天）的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI），并按平均日采食量和平均日增重之比计算料重比（F/G）。

②腹泻率：粪便评分和腹泻频率参照Walsh A M的方法：每天分三个时间点（早、中、晚）观察仔猪的粪便情况，对仔猪粪便进行评分，粪便评分标准参见下表。当评分达到4或以上时认定为腹泻，最后计算仔猪腹泻率。

评分 Sore/分	粪便状态 Fecalfeature
1	粪便成颗粒，较硬
2	较软的便，成条形或断成柱状
3	软便，大致成形
4	稠状或半液体状态，不成形
5	液体状或粘液状，不成形

③血液指标：在正式试验期第28天进行采血。将栏中的仔猪保定，在仔猪空腹状态下，从其前腔静脉采血约10ml分装于血常规管和分离胶采血管中。血常规管中的血样用于检测血常规指标；离胶采血管中的血样，以3500 r·min^-1的转速离心十分钟，取出离心后的血清用于检测血液生化指标。

（3）数据分析：先用Excel 2010对试验数据进行初步整理，再通过SPSS 25.0统计软件进行单因素方差分析（one-way ANOVA），利用LSD进行多重比较，以P0.05作为判断差异显著的标准。

2.技术路线

3.实验方案

（1）实验目的

①设定对照组（CON）：在给仔猪饲用无抗基础日粮的情况下，测定仔猪的生长性能、腹泻率和血液指标；

②设定抗生素组（ANT）：在无抗基础日粮的基础上添加抗生素（75mg·kg^-1金霉素），测定仔猪的生长性能、腹泻率和血液指标；

③设定合生素组（SYN）：在无抗基础日粮的基础上添加合生素（10g·kg^-1的乳果糖和10⁹cfu·kg^-1

的凝结芽孢杆菌），测定仔猪的生长性能、腹泻率和血液指标；

④将3组结果对比分析后，期望合生素组试验结果达到与抗生素组同样良好的效果，为抗生素替代物的探寻提供理论依据和实验指导，最终进一步满足较高养殖效益和减少抗生素使用的的社会需求。

（2）试验材料与饲粮：

抗生素：金霉素购自上海禾丰饲料有限公司。

合生素：乳果糖成分来自雅培杜密克乳果糖口服溶液；凝结芽孢杆菌由江苏远山生物技术有限公司提供。

基础日粮：主要成分见下表。

*每千克预混料提供铁（C₄H₈FeN₂O₄）105.0 mg，铜（CuSO₄·5H₂O）125.00 mg，一水硫酸锌（ZnSO₄·H₂O）22.0 mg；一水硫酸锰（MnSO₄·H₂O）20.0 mg；碘酸钙（Ca(IO₃)₂）0.1 mg；Vitamin A 124.50mg，Vitamin D₃ 23.80 mg， Vitamin E 1044.40mg，Vitamin K₃ 34.40mg，Vitamin B₁ 17.60mg，Vitamin B₂ 89.40mg，烟酸 430.50mg，泛酸237.30mg，Vitamin B₆ 14.00mg，叶酸19.40mg，生物素3.20mg。

（3）试验设计与饲养管理

试验选用27或28日龄断奶的“杜长大”三元杂交阉公猪18头，随机分成三组，每组6个重复。对照组（CTR）只饲喂基础日粮，抗生素组（ANT）在基础日粮中添加75mg·kg^-1金霉素，合生素组在基础日粮中添加合生素（10g·kg^-1的乳果糖和10⁹cfu·kg^-1的凝结芽孢杆菌）。本试验在江苏扬州试验猪场进行，试验仔猪单栏单饲，自由采食和饮水。猪舍内环境控制在22～23摄氏度，定时通风并保持猪舍舒适干净。试验期为35天，其中预试验7天，正式试验28天。试验期内记录定期测定并记录仔猪体重和采食量，记录腹泻情况。试验期最后一天静脉采血，及时测定血液相关指标。

（4）测定指标

①生长性能：试验期间准确记录每天每栏的采食量，正式试验期内第0、7、14、21、28天对仔猪进行空腹称重，最后计算期间（0-28天）的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI），并按平均日采食量和平均日增重之比计算料重比（F/G）。

②腹泻率：粪便评分和腹泻频率参照Walsh A M的方法：每天分三个时间点（早、

中、晚）观察仔猪的粪便情况，对仔猪粪便进行评分，粪便评分标准参见下表。当评分达到4或以上时认定为腹泻，最后计算仔猪腹泻率。

评分 Sore/分	粪便状态 Fecalfeature
1	粪便成颗粒，较硬
2	较软的便，成条形或断成柱状
3	软便，大致成形
4	稠状或半液体状态，不成形
5	液体状或粘液状，不成形

③血液指标：在正式试验期第28天进行采血。将栏中的仔猪保定，在仔猪空腹状态下，从其前腔静脉采血约10ml分装于血常规管和分离胶采血管中。血常规管中的血样用于检测血常规指标；离胶采血管中的血样，以3500 rmin^-1的转速离心十分钟，取出离心后的血清用于检测血液生化指标。

（5）数据处理

先用Excel2010对试验数据进行初步整理，再通过SPSS 25.0统计软件进行单因素方差分析（one-wayANOVA），利用LSD进行多重比较，以P0.05作为判断差异显著的标准。

4.可行性分析

近几年，探索绿色安全的可饲用抗生素替代物已成为动物营养方向的一大研究热点。由于微生态制剂具有无毒、无残留、无耐药性、绿色环保等优点，已有诸多试验研究了微生态制剂在畜牧生产中的应用效果。乳果糖和凝结芽孢杆菌分别作为益生元、益生菌也因其具有改善肠道微生物区系、可降低腹泻率、促进机体免疫功能、促生长等优良功能特性而引起大家广泛关注。因此，本课题将乳果糖与凝结芽孢杆菌配伍形成合生素，以研究其对断奶仔猪的影响，这具有充分的理论依据。同时，前人已完成的大量相关试验可为本试验的研究提供一些参考和方向。

本课题将使用的抗生素与合生素产品均可从生物技术公司或饲料公司购得；试验动物和养殖场地均已联系确定，实验室的资源和条件充足。试验项目已按预期计划顺利开展。

4. 研究创新点

四、特色或创新之处

目前，关于抗生素替代物的研究多种多样，已探索到的抗生素替代物或产品种类主要有植物提取物、中草药提取物制剂、酸化剂、酶制剂、抗菌肽、益生菌、寡糖和多糖等。但与益生菌、寡糖和多糖，或是将二者联合起来形成合生素的相关研究相较而言尚且不足，还有很大的探索空间。此外，有研究表明乳果糖和凝结芽孢杆菌均具与抗生素相似的良好作用，但国内还没有试验将二者联合起来，作为合生素用于畜牧生产，研究其对动物生长性能等的影响。本试验首次将乳果糖与凝结芽孢杆菌配伍制成合生素，用作可饲用添加剂加入断奶仔猪的基础日粮中。

在研究乳果糖-凝结芽孢杆菌对动物的益生作用时，针对血液指标，大多数试验只分析了血液生化指标和免疫球蛋白指标的区别。然而，本试验在考虑血液生化指标的同时，还测定并分析了大量的血液生理指标，这使得结果更加全面、有说服力。

5. 研究计划与进展

五、研究计划及预期进展

2019 年3月中旬，本人在指导教师的指导下确立了研究课题和主要研究方向，并根据本项目研究内容的需求，确定课题后开始查找大量相关的国内外资料，了解有关乳果糖、凝结芽孢杆菌等抗生素替代物的理论基础、研究现状和最新成果，并于2019年6月底前完成文献综述。2019年10月中下旬正式进入实验室课题组，在老师和师兄师姐们的帮助指导下，学习与课题相关的理论知识，动手参与试验操作。目前，课题正按计划有序进行。现已确定的实验进展计划如下：

2019年4月至6月：确定课题，查阅国内外与课题相关资料，完成文献综述；