Rab7在卵母细胞减数分裂中的作用开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

卵母细胞的成熟质量对于受精和早期胚胎发育具有重要意义。哺乳动物卵母细胞成熟是不均等分裂的过程，经历纺锤体的迁移形成第一极体到达mii期等待受精，受精后排出第二极体，形成受精卵。这种独特的不对称性是由卵母细胞减数分裂过程中纺锤体迁移介导的^[1]。而微丝是调控纺锤体迁移的主要力量。减数分裂过程中，纺锤体形成在卵母细胞的中央，然后由肌动蛋白驱动至卵母细胞皮层。基于囊泡的肌动蛋白网络调节机制对于小鼠卵母细胞中减数分裂纺锤体的不对称定位至关重要，这会导致不对称的胞质分裂^[2]。

近年来研究发现膜泡运输rab家族是调控微丝骨架的一类重要因子。rab是一种小gtp酶，rab是细胞内囊泡运输重要的分子开关，与其上游调控子和下游特定的效应子相互作用，并与gtp的结合和水解过程相偶联，在囊泡运输的形成、转运、粘附、锚定和融合等阶段发挥作用^[3]。rab家族成员可调控卵母细胞微丝骨架动力学和细胞器定位^[4,5]，其中rab7是肌动蛋白装配和细胞器功能的必要调节剂。

2.国内外研究概况

2. 研究的基本内容和问题

本课题拟研究rab7在卵母细胞减数分裂中的调控作用。

2.研究内容

本课题将通过rab7在卵母细胞中的表达与定位、rab7 sirna显微注射敲低rab7对卵母细胞细胞骨架以及卵母细胞成熟产生的影响几个方面，研究rab7在小鼠卵母细胞减数分裂中的调控功能。

3. 研究的方法与方案

1.研究方法

实验研究法

2.技术路线

4. 研究创新点

目前尚未有研究证实Rab7蛋白对于卵母细胞减数分裂的调控机制，本课题将通过Rab7在卵母细胞中的表达与定位、Rab7 siRNA显微注射敲低Rab7对卵母细胞细胞骨架以及卵母细胞成熟产生的影响几个方面，研究Rab7在小鼠卵母细胞减数分裂中的调控功能，此次研究具有一定的创新意义。

5. 研究计划与进展

查找并阅读相关文献，整理实验思路，学习与完善相关实验技术；

2019.07.01至2019.08.15

将卵母细胞培养成熟后，进行免疫荧光染色，以检测不同时期蛋白定位，并且根据定位猜测其功能；