1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
课题意义:
胎儿宫内发育迟缓(intrauterinegrowth retardation, iugr)是指是指哺乳动物的胚 胎或胎儿在子宫内生长发育受阻的现象[1]。iugr一般表现为胎儿出生体重较轻,通常判定标准是新生动物出生体重是否低于平均体重的2个标准差或10%,一般来说,体重小于1kg的新生仔猪被认为是iugr仔猪。
姜黄素(curcumin)是从姜科姜黄属植物的根茎中提取的一种天然的黄色酸性酚类物质,是姜黄发挥药理作用的最主要的活性成分。近年来,研究证明姜黄素具有抗氧化、抗炎、抗菌、降脂、对多器官损伤的保护等作用[2]。但目前关于姜黄素对提高机体抗氧化能力的作用多侧重于鼠和肉鸡的药理学基础研究,在猪上也仅限于断奶仔猪方面的研究,在生长猪上的研究的报道较少。因此,本试验通过日粮中添加姜黄素,研究其对iugr生长猪生长性能、肉品质及抗氧化能力的影响,并为姜黄素的研究及其在畜牧业中的应用提供依据。
2. 研究的基本内容和问题
1 研究目标
本试验旨在探索日粮中添加姜黄素对iugr生长猪生长性能、肉品质及抗氧化能力等方面的影响,为姜黄素在iugr生长猪生产中有效的使用提供理论依据,并探讨姜黄素发挥作用的相关机制,为姜黄素的研究及其在畜牧业中的应用提供一定的理论依据。
2 研究内容
3. 研究的方法与方案
4 研究方法及试验方案
4.1 试验动物及分组
本试验在胎次相近、妊娠期相近的母猪所产的仔猪中选择18头26天断奶仔猪,其中包括6头正常出生重(NBW)断奶仔猪和12头宫内发育迟缓(IUGR)仔猪,分为3组,每组6个重复,试验设计及分组见下表1。
表1 试验设计及分组
组别 | 日粮组成 |
NBW组 | 基础日粮 |
IUGR组 | 基础日粮 |
IUGR 姜黄素(IUGR Cur)组 | 饲喂基础日粮 200 mg/kg姜黄素 |
4.2 饲养管理
对所有猪舍定时进行清洁消毒,保持温度在25-28℃,湿度保持在50%-70%。采用自由采食和饮水的饲养模式,严格按照国家防疫标准和程序进行防疫工作并观察和记录猪的健康状况。
4.3 样品采集
饲养试验结束后(115d),所有猪电击放血致死,然后迅速取猪同侧腿部肌肉置于液氮中进行速冻并放入-80℃的冰箱进行保存以备后期样品测定。4.4 测定指标
4.4.1 生长性能测定
分别于试验开始第0d、26d、56d、115d的当天晨饲前逐栏称重,记录始重和末重,计算出平均日增重(ADG),试验开始后,定期记录投料量和最后余料量,计算出每组总耗料量和计算平均每头日采食量(ADFI)。根据ADG和ADFI计算耗料增重比(F:G)。
4.4.2 滴水损失测定
将猪屠宰后取的腿肌肉样修剪成5cm×3 cm×2 cm的肉样,称重(W1)。然后悬挂于4度冰箱中保存,24 h后取出擦去表面水珠后称重(W2),48 h后取出擦去表面水珠后称重(W3),最后计算滴水损失率:24 h滴水损失(%)=(W1-W2)/W1×100%,48 h滴水损失(%)=(W1-W3)/W1×100%。
4.4.3 抗氧化指标检测
准确称取腿肌样品重量,匀浆后离心,取上清进行测定丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧
化酶(S0D)、促甲状腺激素(TSH)、过氧化物酶(POD)的活性。测定试剂盒均购于南京建成生物工程研究所,具体测定方法均按试剂盒说明书进行。
4.4.4 矿物质浓度检测
将酸混合物(HNO3:HClO4 = 4:1,v:v)添加到肌肉样品(约1.0g)中,在室温下静置12小时,然后用高温处理直至完全消化。高温消化步骤如下:90℃,30分钟;120°C ,30分钟;160°C,120分钟;210°C,210分钟。将消化液用5%HNO3溶液稀释至最佳水平,以便进一步测定。通过相应的标准品(用5%HNO3溶液稀释)确定与基质匹配的外部标准曲线后,用电感耦合等离子体发射光谱法(ICP-OES)分析空白和制备的样品溶液。
4.5 数据分析与统计
试验数据采用Excel2013进行初步整理,用SPSS 18.0软件进行统计分析,采用单因素方差(One-way ANOVA)分析进行差异显著性检验,各处理组采用Duncan’s法进行多重比较。P值小于0.05时认为差异显著,统计结果以平均值±标准差的形式表示。
5 技术路线
6 可行性分析
本研究在理论上是可行的,试验指导教师所在实验室主要研究动物生长的营养调控及饲料源生物活性物质的开发与应用等方面,积累了丰富的相关研究经验。实验室的师兄师姐协助进行该项研究,是本次研究顺利进行的强有力的保障。指导教师所在实验室具备本研究所需的各种生化分析仪器设备,可为本研究的顺利进行提供条件保障和强有力的技术支持。本人专业基础知识扎实,具备不畏困难、坚持不懈、追求创新的精神,有积极的自主学习与钻研精神,可以确保本次研究的顺利进行。
4. 研究创新点
日粮中添加姜黄素对IUGR生长猪抗氧化能力的影响方面的研究较少
5. 研究计划与进展
2019年5月——2019年8月 查阅文献,完善试验计划;
2019年8月——2020年12月 饲养iugr生长猪试验;
2020年3月——2020年4月 实验室测指标;
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