1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
(一)研究背景
1.arf gap1的来源和作用
二磷酸腺苷-核糖基化因子1(adp-ribosylation fact1,arf1)是二磷酸腺苷-核糖基化因子(adp-ribosylation facts,arfs)家族的一员,属于ras超家族[1],在结构上非常保守,广泛存在于酵母、植物和动物中,能够调节囊泡运输和细胞器结构[2],参与磷脂代谢,调节膜表面的肌动蛋白细胞骨架[3],并具有激活脂质修饰酶的作用[4]。arf1定位于哺乳动物细胞中的高尔基体,在内质网(er)和高尔基体之间的膜运输中起重要作用[5]。
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2. 研究的基本内容和问题
(一)研究目标:
探明arf gap1在卵母细胞成熟中的调控作用
(二)研究内容:
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3. 研究的方法与方案
(一)研究方法及实验方案
1. 采卵及培养
取spf级3-4周小鼠卵巢,置于培养皿中剁碎,用m16培养液悬浮,在实体显微镜下捡取生发泡明显均一的gv期卵母细胞,最后培养液洗4次后上盖石蜡油进行成熟培养,于37 ℃、5 co2、饱和湿度的培养箱中培养。
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4. 研究创新点
在已知的研究中,arf1是一种在真核细胞中存在的单体gtp结合蛋白,能激活adp-核糖基化转移酶,影响卵母细胞减数分裂。但是很少有研究arf gap1在生殖系统中的作用,特别是对arf gap1影响卵母细胞成熟的机制。因此,本研究方向具有前沿性和创新性。
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5. 研究计划与进展
1.前期准备
(1) 确定课题内容及名称。
(2) 查阅文献资料,自主学习分析文献并了解arf gap1,卵母细胞相关知识。
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