三株猪源菊粉酶产生菌产酶特性和抗逆性的研究开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

目前仔猪早期断奶应激已经成为制约规模化养猪发展的问题，其中腹泻是早期断奶仔猪最常见及危害性最大的断奶应激疾病。

生产中常通过在日粮中添加各种抗生素来减少腹泻，但随着抗生素的使用，使病菌的抗药性也不断增强，动物体内药物残留加剧，引起畜产品安全问题。

微生物制剂作为一种无毒、无残留、无抗药性的饲料添加剂，是抗生素有效的替代产品之一。

2. 研究的基本内容和问题

1 研究目的现代化养猪生产中，由于断奶、换料等造成的仔猪腹泻常通过抗生素减缓，随着饲用抗生素添加的规范，仔猪腹泻将面临更严重的挑战。

菊粉作为一种分布广泛的果聚糖，具有降血脂、促进金属离子吸收、改善肠道环境等功效，是低成本、易获取的益生元。

将菊粉和猪源菊粉酶产生菌结合使用，能使菌群更好地在肠道中定植，较好解决断奶仔猪腹泻问题。

3. 研究的方法与方案

1 研究方法1.1 生长曲线的测定将菌液接种到培养基中发酵，用紫外分光光度计测定不同时刻的od值绘制成生长曲线。

1.2 菊粉降解情况1.2.1苯酚-硫酸法测定总糖含量①果糖标准溶液Ⅰ（1 mg/ml）的配制：精确称取标准果糖0.1g置于100 ml容量瓶中，以蒸馏水定溶至刻度，摇匀，4℃冰箱中备用。

②标准曲线的制作按照下表依次添加试剂：（见附件图1）静置10 min，摇匀，在室温下放置20 min，然后吸取200 μl在490 nm处测其吸光值，用①的od值做参比，以吸光值为横坐标，以标准果糖溶液浓度为纵坐标，绘制标准曲线。

4. 研究创新点

1.现在发现的菊粉酶产生菌都来自于土壤、菊芋等植物的表皮，尚未有动物源的菌株，本课题从猪肠道内分离菊粉酶产生菌。

2.评价指标除了一般饲用益生菌的评价指标，如耐酸性、耐胆酸盐性、耐高温等指标外，还对菊粉酶产生菌评价其对菌粉的降解能力以及产菊粉酶的能力

5. 研究计划与进展

2016.10 复活经纯化冻存后的菌株，测定各菌株的生长曲线2016.11 采集各菌株0、24 h发酵液，测定总糖含量和还原糖含量，分析菌株对菊粉 降解情况2016.12 探究不同菌株的耐热性、耐酸性、耐胆盐性以及耐胰蛋白酶性2017.03 完善试验，分析数据，论文撰写