1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等(列出主要参考文献)
(1) 课题意义
色氨酸是鱼类的必需氨基酸之一,只能从饲料中获得[1]。由于一些饲料所含色氨酸的量与动物所需的色氨酸的量相比较低,色氨酸已成为第三限制性氨基酸。在饲料中添加色氨酸可以提高蛋白质利用率[2]。色氨酸作为氨基酸之一,具有参与体蛋白质的合成、促进鱼类生长的基本功能。除此之外,它还能调节免疫和消化功能[2-4],这是因为色氨酸中的吲哚基团使色氨酸具有较强的活性,作为前体物质,生成褪黑激素,影响鱼类的免疫功能。色氨酸的另一个中间产物5-羟色胺(5-ht)能够影响应激诱导皮质醇分泌,lepage[18]曾对虹鳟做实验证明,提高色氨酸含量能够抑制应激诱导皮质醇浓度升高,而且不同浓度的色氨酸含量效果不同。这一结果有可能是色氨酸引起了下丘脑垂体肾间组织轴(hypothalamus-pi-tuitary-interrenalaxis,hpi)的反馈抑制途径,也有可能是5-ht抑制了应激诱导的皮质醇升高。这就是色氨酸的抗应激功能。但是还有很多需要进一步研究,对于色氨酸的需求量,不同的鱼差异很大,而且研究的实验结果也有差别。目前有很多关于畜禽动物的研究,但是水产动物方面涉及的很少,此次实验专门针对团头鲂幼鱼,为以后的研究提供依据。
2. 研究的基本内容和问题
研究的目标、内容和拟解决的关键问题
1研究的目标
本实验将会从团头鲂的生长性能、体成分和血清生化指标的角度,探讨团头鲂对色氨酸的最适需要量以及色氨酸对团头鲂上述指标的影响,期望通过实验所获得的数据来为将来研制安全环保且高效的饲料添加剂提供参考依据。
3. 研究的方法与方案
研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析
1 研究方法
通过在饲料中添加不同水平的色氨酸来确定色氨酸对团头鲂幼鱼生长、体成分和血清生化指标的影响,确定团头鲂的色氨酸最适需求量。
2 技术路线
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3 实验方案及可行性分析
3.1 试验日粮
饲料分别添加不同的水平的色氨酸并且各试验组饲料其他营养水平保持一致,一天3次。
3.2试验管理
将团头鲂幼体在试验前先在养殖桶中暂养驯化15天,然后进行分鱼,将相同规格的鱼分到相应的网箱中,每网箱30条,每组3个平行,共18桶。正式试验期间投喂含不同水平色氨酸配合饲料,以鱼体重的4%~6%饱食投喂(每隔2周对鱼体进行一次称重,以便调整饲料投喂量),每天投喂3次(8:00,11:00,16:00),每次分2-3遍投喂并注意观察吃食情况,投饵过程中尽量保持安静,防止额外应激,每周测一次水质。每日观察鱼摄食及死亡情况, 发现死鱼及时捞出称重记数,并检查死亡原因。试验期间水温26℃左右,pH为7.2~7.8,溶氧和氨氮分别大于5mg/L和小于0.01mg/L。正式试验饲养8周后,称量每个网箱的总重,计算增重率、特定生长率和饵料系数等指标。在每个网箱中随机抽取3尾团头鲂,采血,并分离血清,量取体长、体重以及肝脏重以计算肝体比、肥满度等指标。
3.3采样与处理
饲养试验结束后,禁食24 h,将各桶鱼称重计数,每桶随机选取3尾团头鲂,用浓度为200 mg/L的MS-222作快速深度麻醉,经称重和量体长后用一次性医用注射器从尾静脉采血。血样以4℃ 7500r /min 离心5min 制备血清,-80℃冻存备用。鱼体采血后立即剖开腹腔,剥离出内脏和肝脏并称重(血细胞计数)。
3.4 测定指标与方法
3.4.1 生长与形体指标
分别按下式计算增重率(weight gain rate,WGR) 、特定生长率(specific growth rate,SGR) 、饵料系数(Feed conversion ratios,FCR)、肝体比(hepatosomatic index,HSI) 、内脏比(viscerosomatic index,VSI)、肥满度(conditionfactor,CF) :
增重率 WGR=(鱼体末重-鱼体初重)/鱼体初重100% ;
特定生长率SGR=(ln鱼体末重-ln鱼体初重)/养殖天数100% ;
摄食率FI(%/d)=100摄食饲料量/[(鱼体初重+鱼体末重)/2]/养殖天数100% ;
饲料效率FE= 鱼体增重/摄食饲料量100% ;
肥满度CF= 鱼体重(g)/鱼体长(cm)3100% ;
肝体比HSI=肝重/体重100% ;
3.4.2 体成分测定
粗蛋白含量采用凯氏定氮法,粗脂肪含量采用索氏抽提法,粗灰分含量采用550℃灼烧法,
水分含量采用105℃烘箱干燥法进行测定。
3.4.3 血清生化指标
血清参数(ALT、AST、UREA)等在血清生化分析仪测定。
3.5 数据统计与分析
试验数据用SPSS 16.0统计软件包中的单因素方差分析(One-way ANOVA),若差异显著时,再进行多重比较(Duncans procedure),P0.05表示差异显著,所有的结果均以平均值标准误(mean SE)表示。通过折线法(Broken-line),根据团头鲂幼鱼的特定生长率和饵料系数与饲料中色氨酸含量的相关性得出其最适色氨酸需要量。
4. 研究创新点
通过在饲料中添加不同水平的色氨酸来确定色氨酸对团头鲂幼鱼生长性能、体成分和血清生化指标的影响,确定团头鲂的色氨酸最适需求量。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
1研究计划
(1)2016.07-2016.08 查阅资料,拟定试验方案,进行实验暂养驯化。
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