过氧化氢诱导的肉鸡腿肌氧化损伤作用及对肉品质的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

1.本课题的意义：

氧化应激能够引起肉鸡机体氧化损伤，导致肉鸡肉品质的下降，严重危害肉鸡产业的发展。氧化应激源类型众多，在实际生产中，肉鸡氧化损伤往往是由多种应激源联合引发的氧化应激导致的。因此，研究氧化应激引起的肉鸡氧化损伤作用对生产中寻求科学合理缓解肉鸡氧化应激的管理与营养调控手段具有重要科学意义。

本质上讲，氧化过程与动物机体的ros水平密切相关。目前，家禽氧化研究大都以单一应激源刺激机体间接产生ros为前提，由于应激源性质不同且处理方法不一，使得氧化应激对肉鸡肌肉的作用研究不明确。h₂o₂作为一类代表性的活性氧，可以由几乎所有的氧化应激源刺激机体产生并且可以分解产生其他类的自由基来影响机体氧化和抗氧化平衡。因此本课题拟选取爱拔益加（aa）肉鸡为研究对象，采用注射h₂o₂的方法，聚焦肉鸡腿肌肉品质以及氧化产物含量和抗氧化酶活性变化，揭示氧化应激对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化性能的影响。本项目研究可探索通过注射h₂o₂引起氧化应激的效果，并拟阐明h₂o₂诱导的肉鸡腿肌氧化损伤影响，为肉鸡生产中建立科学缓解氧化应激的管理与营养调控策略提供理论依据。

2. 研究的基本内容和问题

1.研究的目标：

探索通过注射h₂o₂引起肉鸡氧化应激的效果，研究氧化应激对肉鸡腿肌肉品质和抗氧化性能的影响，为肉鸡生产中建立科学缓解氧化应激的管理与营养调控策略提供理论依据。

2.研究内容：

3. 研究的方法与方案

1.研究方法：

本试验通过注射H₂O₂，研究氧化应激对肉鸡腿肌抗氧化性能和肉品质的影响。

2. 技术路线（见附件）

3. 实验方案：

3.1 试验设计

试验采用单因素试验设计。选取体重均匀的320只1日龄公雏肉鸡，随机分成5个处理，每个处理8个重复，每个重复8只，进行饲养试验，饲养期42天。在饲养期第42天进行屠宰，试验期第16和37天进行过氧化氢溶液注射。注射量为1 mL/kg BW。具体分组情况见表1。

表1 试验设计及分组

3.2饲养管理

试验在南京康欣禽业有限公司进行，按照饲养管理按《AA肉鸡饲养管理手册》进行。肉鸡饲养于同一鸡舍内，采用多层笼饲养，自由采食和饮水，自然光照，免疫程序按常规进行。试验为期42天。

3.3 样品采集

饲养试验第42天，对试验鸡进行空腹称重，然后每重复随机选取1只鸡，颈动脉放血处死。待肉鸡死亡后立即解剖，并于第42天采集腿肌样品，将一部分肌肉样品放置于4℃保存，待测肉品质指标。另一部分置于1.5 mL RNase-Free离心管中，液氮保存待测分子指标。

3.4 测定指标

肉品质测定：①测定肉样的pH值（pH_45min和pH_24h）：pH_45min：屠宰后45分钟测定，用已经校准的pH计取三点测定，求平均值。pH_24h：屠宰后24小时测定，用已经校准的pH计取三点测定，求平均值。

②肉色（L*、a*、b*）：屠宰后24h测定，用已经校准的色差仪取三点测定，求平均值。

③滴水损失：屠宰后1小时内取腿肌（长5cm、宽3cm和厚2cm）称重（W₁），用铁丝钩住肉样一端，使肌纤维垂直向下，装入塑料袋中，肉样不得与袋壁接触，封口后在4℃冰箱中吊挂24小时候称重（W₂）。按公式计算：滴水损失=（W₁-W₂）/W₁100%。

④蒸煮损失和剪切力值：将屠宰后成熟24h的腿肌肉样修成适当大小后放入适当大小的蒸煮袋，将温度计探头由上而下插入至肉块中心，记录肉块的初始温度，将蒸煮袋口用专用的夹子夹住，之后按站立方式放入72℃水浴锅内固定架中，当肉块中心温度达到70℃，记录加热时间，立即取出，放入自来水中冷却半小时，然后转入4℃冷库中过夜。蒸煮前后分别两次称量肉重m1和m2，按照以下的公式计算蒸煮损失：蒸煮损失=（m₁m₂）/m1100%。将肉样按肌纤维走向修成5cm1cm1cm的长条后，置剪切仪的操作台上操作测定剪切力。记录数字显示屏上显示的读数，即剪切力值（kg或N）。每个长条切四次，用平均值表示。剪切值越小，嫩度越好。

抗氧化酶活性测定：使用南京建成的试剂盒进行总抗氧化能力（T-AOC）、总超氧化歧化酶（T-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性测定。

氧化产物含量测定：使用南京建成的试剂盒测定丙二醛（MDA）、蛋白巯基和蛋白羰基含量。

3.5结果处理

数据采用SAS9.2软件进行统计学处理，方差分析使用单项方差分析（One-way ANOVA），多重比较采用Duncans法，P0.05为差异显著。

4．可行性分析：

本试验拟采用过氧化氢注射的方式引起机体氧化应激。由于过氧化氢自身即为高活性氧，即便分解也产生羟基自由基等产物，因此我们认为选择过氧化氢来影响机体氧化状态是有一定的理论依据的。并通过测定机体氧化状态下腿肌肉品质以及抗氧化酶活和氧化产物含量的影响，来揭示氧化损伤和肉品质的关系具有一定的理论基础。

本试验设计科学合理，在本课题研究之前，我们的研究人员已经取得了与本试验设计相关的研究成果，有一定的研究基础。利用本院实验室的研究设备和仪器，指导教师和研究生的帮助，保证本试验的顺利完成。

4. 研究创新点

特色或创新之处

过往的氧化应激研究多以应激源间接刺激产生ROS为前提，直接增加活性氧导致机体氧化状态的研究较少，且多为体外试验。此外，动物研究相对较少，在肉鸡上的研究几乎没有。而本课题拟选取爱拔益加（AA）肉鸡为研究对象，采用过氧化氢注射，聚焦体内氧化和抗氧化过程中的关键酶活性变化，研究氧化应激对肉鸡腿肌氧化损伤的影响；探究氧化应激对鸡肉腿肌肉质的影响；阐明在不同程度的氧化刺激下腿肌氧化损伤与腿肌肉质变化的关系。

5. 研究计划与进展

2016年7月-2016年8月，查阅相关文献，初步制订试验方案。

2016年9月-2016年10月，完善实验方案，准备试验所需。

2016年11月-2016年12月，按照试验方案进行饲养试验，并取得所需组织样,保存