1型糖尿病对断奶小鼠卵巢和卵泡发育的影响开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

糖尿病是一种严重危害人类健康的慢性内分泌代谢性疾病。每年有数百万人死于空腹高血糖带来的并发症。其中1型糖尿病是一种自身免疫性疾病，以t淋巴细胞介导的胰岛b细胞损伤为主要特征，最终使胰岛素分泌绝对缺乏从而导致血糖的持续升高。其特征表现为：①抗胰岛细胞抗体的存在；②胰岛素的严重缺乏；③胰岛b细胞被自身免疫破坏。尽管1型糖尿病患者只占到世界糖尿病人口约10％的的比例，但因其发病率持续增长，从而成为主要的全球性健康问题之一^[7]。

高血糖在短期内可引起易渴、多尿、易饿及体重减轻方面的症状，但在较长时间内，会引起微血管并发症和大血管并发症。这些并发症是糖尿病患者致残或致死的主要原因^[1]。糖尿病不仅会引起微血管、大血管病变，还会影响卵泡和胚胎的发育^[2]。moley等发现高糖可诱导小鼠囊胚期葡萄糖转运蛋白表达下调，降低葡萄糖摄取量，进而降低胚胎内葡萄糖水平，葡萄糖转运减少，会诱导囊胚凋亡^[3]。除此之外，糖尿病大鼠破碎胚胎的数目增加，囊胚内细胞团细胞数量减少^[4]。原因可能是高糖通过细胞死亡效应途径诱导胚胎凋亡。除此之外，糖尿病小鼠卵巢类固醇生成降低，颗粒细胞凋亡增加，以及卵母细胞发育延迟^[5]。根据以上结果可以推测母体糖尿病的损伤最早可追溯到卵母细胞时期，并且卵母细胞受到的损伤会引起后代受精后胚胎发育异常甚至代谢疾病。小鼠生后卵巢发育的形态学变化研究发现，小鼠生后第1d的卵巢占有许多原始卵泡及少量间质，生后5天卵泡开始生长，第10天卵泡膜开始形成，第15天透明带开始形成，间质腺出现，20天后很多卵泡生长发育，至40天可见成熟卵泡和黄体^[16]。 对于大多数哺乳动物来说，出生时卵母细胞停滞在第一次减数分裂前期的双线期，也就是生发泡(germinal vesicle，gv)期，直到性成熟^[6]。

早期卵泡的发育对性成熟后动物繁殖能力具有重要影响意义，同时疾病、遗传以及环境都会对早期卵泡的发育造成影响。越来越多的研究发现，当机体长期处于高血糖的环境中时，将会通过多种途径对卵巢的功能产生影响，从而影响卵泡的发育^[8]。本课题将研究i型糖尿病对小鼠卵巢卵泡发育的影响，以期为畜牧生产或医学中解决糖尿病引起的雌性繁殖障碍提供解决思路。

2. 研究的基本内容和问题

本实验利用链脲菌素(Streptozotocin，STZ)诱导糖尿病小鼠模型，观察糖尿病对断奶小鼠的卵泡发育的影响，尤其是卵泡的早期发育，试图阐明糖尿病对早期卵泡发育的影响。

3. 研究的方法与方案

链脲佐菌素( streptozotocin，stz )是目前国内外使用较多的制备糖尿病动物模型的药物。小剂量多次注射stz，可以诱导免疫细胞浸润聚集在小鼠胰岛周围，对胰岛b细胞产生逐步的轻微损伤，与临床t1dm发病过程相似，更接近于人类t1dm的发病过程。从而建立糖尿病小鼠模型，并以此为研究对象，探究小鼠卵泡发育的情况。

实验方案

1 模型制作

4. 研究创新点

以往的研究对象多以性成熟后的小鼠来探究1型糖尿病对其的机体各方面影响，而本实验的研究对象为断奶小鼠，卵巢还处于未成熟状态，主要是探究1型糖尿病对其早期卵泡发育的影响。

5. 研究计划与进展

研究计划：

2015年9月2015年10月：阅读相关资料（文献和书籍）

2015年10月2016年1月：购买试验与耗材，进行试验