罗伯茨绿僵菌对玉米的促生作用研究开题报告

1. 研究目的与意义

【研究背景】
1879年俄国生物学家metchnikoff首次从奥地利金龟子上成功分离得到金龟子绿僵菌(m. anisopliae),并将其应用于防治奥地利金龟子，随后绿僵菌逐渐成为农业害虫生物防治的研究热点。

绿僵菌作为我国及全世界应用较广泛且研究较多的一类昆虫病原真菌，除能寄生杀死靶标昆虫外，还能够在植物根部定殖并促进宿主植物生长，已有多个研究表明绿僵菌可以促进植物的生长，尤其是在胁迫条件下。

如玉米内生菌罗伯茨绿僵菌可促进玉米植株生长，抑制小地老虎的发育和改变植物防御基因的表达；现还有研究发现绿僵菌定殖玉米根部与促进玉米植株生长的能力较优，可进一步进行毒力测试从而筛选出具有良好杀虫与植物生长增效于一体的绿僵菌生防菌株。

2. 研究内容和预期目标

【研究内容】
本实验以玉米为实验对象,研究罗伯茨绿僵菌对玉米的促生作用。

一定浓度的罗伯茨绿僵菌的孢子液浸种，水培方法培养实验材料，通过对实验材料的萌发指标（发芽率，发芽指数等），叶绿素含量、脯氨酸含量、mda（丙二醛）含量、pod（过氧化物酶）活性、cat（过氧化氢酶）活性、sod（超氧化物歧化酶）活性、nr（硝酸还原酶）活性、氧自由基产生速率、质膜透性等指标的动态测定，探明罗伯茨绿僵菌菌株对宿主植物玉米生理指标的影响。

【预期目标】
1、清点和准备实验研究中可能使用的实验试剂，器材和仪器，有些试剂溶液需提前配制和标定，有些仪器未使用过提前学会使用方法。

3. 研究的方法与步骤

【研究方法】
以玉米为实验对象，用一定浓度的罗伯茨绿僵菌的孢子液浸种，以水培方法培养实验材料，动态测定实验材料的萌发指标（发芽率，发芽指数等），叶绿素含量、mda（丙二醛）含量、pod（过氧化物酶）活性、cat（过氧化氢酶）活性、sod（超氧化物歧化酶）活性、nr（硝酸还原酶）活性、氧自由基产生速率、质膜透性等指标，多次测量数据进行差样分析。

各指标的测定方法：
（1）萌发指标
发芽率=（发芽种子数/试验种子数）100%
发芽指数（gi）=∑（gt/dt） gt为发芽试验周期内每日发芽数，dt为发芽日数
（2）叶绿素含量
使用叶绿素测定仪测定水稻叶片的不同部位的叶绿素含量，测定30组，取平均值即可。

（3）mda（丙二醛）含量
在高温和酸性条件下，丙二醛与硫代巴比妥酸（tba）反应，生成红棕色的3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二酮（三甲川），在532nm处有最大吸收波长。

4. 参考文献

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5. 计划与进度安排

（1）2024-2024-1学期17-19周及2024-2024-2学期第1周-第3周（2024年12月19日～ 2024年3月10日），查阅资料和文献，完成开题报告，外文论文翻译；
（2）第4周-第6周（2024年3月13日～3月31日），浸种，学习培养实验材料，摸索实验方法；
（3）第7周-第11周（2024年4月3日～ 2024年5月5日），培养水稻幼苗，熟悉实验方法，确定处理的浓度及方法，测定生理指标；
（4）第12周-第13周（2024年5月8日～5月19日），收集实验结果，分析数据、撰写论文初稿及修改论文，准备答辩ppt。

（5）14周-15周上半周（2024年5月22日～ 5月31日），提交论文终稿和英文翻译，毕业答辩。