1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
意义:肝脏是动物体内十分重要的代谢器官和消化器官,肝的主要功能是分泌胆汁,同时具有解毒、防御、物质代谢、造血、贮血等作用。肝脏系统的疾病是犬临床常见病,根据国内外研究显示,肝病是引起犬死亡的主要疾病之一。各类型疾病的发生,均伴有不同程度的肝损伤,所以在动物疾病的预防和治疗过程中,保肝十分重要。
研究进展:脂肪组织存在于所有哺乳动物和部分非哺乳动物体内,主要分布在皮下组织、腹膜内区域以及多种重要器官表面。1970年,科学家们首次描述并提出“脂肪前体细胞”的概念;1975年,green等从人体组织中分离得到脂肪前体细胞;2001年,zuk等首次在体外验证了脂肪干细胞的多潜能性。从此,脂肪源性干细胞被认为是一类来源于脂肪组织的间充质干细胞,具有自我更新与多种分化潜能,通过分离培养可以在体外稳定增值,在特定的诱导条件下,可以被分化诱导为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞等。李淑萍的实验证明ccl4进入肝脏后,经肝脏药物代谢酶代谢产生了自由基,引起脂质过氧化反应,致使膜结构和功能受损,肝细胞坏死。 saito等人的实验用adscs与肝细胞共培养,对肝细胞的存活率进行评估,证实通过共培养,adscs提高了肝细胞的存活率。seki等人的实验通过建立大鼠部分肝切除和缺血再灌注肝损伤模型,静脉移植adscs48 h后,对一系列肝再生指标进行了评估,结果证实adscs在体内也具有明显的促进肝细胞再生的作用。tautenhahn等将adscs移植入急性肝衰竭大鼠,注射48 h后,肝功能明显好转、肝细胞凋亡率下降,增殖率提高。
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2. 研究的基本内容和问题
研究目标:探究脂肪干细胞用于犬肝损伤的治疗效果
实验内容:1.建模 实验通过给犬注射四氯化碳建成犬的肝损伤模型,
2.治疗 实验组犬用干细胞进行治疗,对照组犬用保肝药物治疗,通过比较每组犬治疗前后的各项指标,及两组犬治疗效果的差异,表明脂肪干细胞用于治疗犬的肝损伤是可行的,并且效果优于一般治疗法的保肝药,为临床治疗提供参考。
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3. 研究的方法与方案
实验方案:
1.四氯化碳肝损伤模型的造模:
将四氯化碳配合植物油,对犬进行腹腔注射,同时配合饮食调节,定时检测犬的各项功能指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶、总胆红素、总蛋白、白蛋白等),并通过x光、b超等影像学方法证实造模成功。
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4. 研究创新点
目前干细胞治疗在小动物临床比较少见,也还存在着很多不足。
随着研究的深入,为脂肪干细胞用于犬的临床治疗提供材料。
5. 研究计划与进展
研究计划:计划实验犬9只,分3组,每组3只,a组犬(空白对照,不进行任何试验),b组犬(实验组,造模成功后用干细胞治疗)、c组犬(对照组,造模成功后用保肝药进行治疗),四氯化碳溶液、干细胞、注射器等常规实验材料、超声扫描仪等仪器。
5月1日-5月5日 准备实验动物、材料、试剂,制定实验计划
5月6日 实验动物分组,采样做各项检查,记录数据
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