试验性穿透性犬角膜移植开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

近年来随着我国宠物饲养数量的增多，在临床上出现大量的犬、猫角膜病病例，常见的疾病有角膜溶解性溃疡、角膜全层透创、后弹力层膨出以及角膜穿孔等。

角膜疾病虽然很少致宠物死亡，但应用药物治疗效果并不显著，最终导致宠物失明，给宠物和主人带来诸多不便。

而通过施行角膜移植术，则能很好地解决这些问题。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标：探索在小动物临床开展穿透性角膜移植的术式，并在术前进行组织配型实验，努力提高小动物穿透性角膜移植术的成功率，为今后临床具体应用提供参考。

研究内容：(1)试验犬基因序列同源性分析；(2)影响小动物穿透性角膜移植术成败的关键；(3)试验犬穿透性角膜移植手术的具体操作与应用与术后密切观察角膜转归情况观察。

拟解决的关键问题：掌握犬穿透性角膜移植术的基因序列同源性分析方法和手术方法的应用。

3. 研究的方法与方案

研究方法：(1)试验犬眼睑组织基因序列同源性分析试验犬眼周局部麻醉，采集上眼睑组织约20mg，抽提dna，pcr扩增纯化，进行琼脂糖凝胶电泳，切下含目的基因片段的凝胶进行回收，测序，分析其同源性并构建系统进化树。

(2)选择基因序列同源性最高的两只犬进行穿透性角膜移植手术术前准备：手术室紫外线灭菌，常规手术器械高压蒸汽灭菌，眼科显微器械在0.1%新洁尔灭内浸泡消毒后用生理盐水清洗后备用。

术前3d剪除术眼睫毛和睑缘周围3cm范围被毛，结膜囊滴0.25%氯霉素眼药水，每天3次。

4. 研究创新点

(1)小动物眼科手术在我国还未普及，我院购置大量眼科手术专业器械如眼科剪、眼科镊、开睑器、压陷式眼压计、眼科手术用显微镜、角膜环钻、角膜剪、角膜镊、结扎镊、显微持针器、铲形针、裂隙灯显微镜等，通过本次及之后一系列眼科手术试验后，将率先设立眼科手术室；(2)通过与学院预防兽医实验室合作，进行角膜移植手术前的配型实验，以提高手术成功率。

5. 研究计划与进展

2016.9-2016.10查阅文献，搜集资料，设计实验方案。

2016.10-2016.11实验准备：联系预防兽医实验室、试验犬编号饲养。

2016.11主要完成基因序列同源性分析实验；分析方案中存在的问题，进一步完善实验方案，准备中期检查汇报。