鸽疱疹病毒感染的PCR检测和序列分析开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

鸽疱疹病毒早在 1945 年就有报道，先后在英国、前捷克斯洛伐克、澳大利亚、比利时、匈牙利、德国、法国和意大利被发现。

在欧洲，大多数鸽子都受到了该病毒的感染，50% 以上的鸽子有该病毒特异性抗体[1]。

疱疹病毒（herpesviruses）是一群中等小的双股 dna 病毒，其成员有 100 个以上，根据其理化性质可分 α、β、γ 3个亚科[2]。

2. 研究的基本内容和问题

本研究的目标是对江苏浦口某赛鸽场病死鸽发病原因进行了探讨，并对该地区相应疾病的流行病学进行调查分析，以期建立该赛鸽场的发病库。

本研究内容主要分为5部分1、临床检查和病理剖检：观察病鸽临床症状，剖检病死鸽，观察其病理变化2、病料采集：采集病死鸽肝脏冷冻保存，待后续检查3、DNA提取：按相应步骤提取DNA，-20℃保存4、PCR：查找文献，设计相应引物，PCR扩增，凝胶电泳鉴定5、序列分析：PCR产物回收纯化，PCR产物片段与 PMD-18T Vector连接转化，序列分析拟解决的关键问题是鸽疱疹病毒PCR引物设计，鸽疱疹病毒PCR鉴定的可行性分析，PMD-18T Vector连接转化，序列分析。

3. 研究的方法与方案

研究方法：1、临床检查和病理剖检：询问发病的时间、地点、数量、年龄、性别，是否免疫等，调查饲养管理制度和方法。

观察被毛和营养状况，检查四肢、结膜颜色、皮肤等有无异常，肛门附近有无粪便污染等。

剖检时应先进行皮下肌肉检查，再打开腹腔进行检查，接着胸腔剖开及各器官检查，最后口腔及颈部器官检查。

4. 研究创新点

国内对鸽疱疹病毒在赛鸽的研究较少，本研究主要通过对赛鸽场病死的赛鸽发病原因进行了探讨，并对该地区相应疾病的流行病学进行调查分析，以期建立该赛鸽场的发病库。

5. 研究计划与进展

病料的采集及保存（9月份）查阅相关资料书籍，收集相关资料（9月份）DNA的提取、引物设计、PCR鉴定（9-10月份）PCR产物的纯化、PCR产物片段与 PMD-18T Vecto连接转化、质粒提取、测序比对（10-11月份）撰写毕业论文（12月份）