1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
大肠杆菌是大肠埃希菌的俗称，属于肠杆菌科，埃希菌属，自然界中大肠杆菌种类很多，其中大多数为非致病性大肠杆菌，对肠道生理功能的维持具有积极意义。但仍存在某些致病性大肠杆菌可引起人或动物的腹泻、泌尿道的感染、肺炎、败血症、心内膜炎、幼儿脑炎，家禽的卵黄性腹膜炎、肉芽肿等病症[1]，对人和动物的健康均产生严重危害。
病原菌对抗生素的广泛耐药成为未来医学灾难的一个威胁，目前国内外研究表明大肠杆菌几乎对大多数抗菌药物都可以产生耐药，包括氟喹诺酮类，碳青霉烯类药物等，并对常用的β-内酰胺类抗菌药也表现很高的耐药性[2-6]。
多粘菌素是从多粘杆菌培养液中获得的一种古老抗生素，包括5种不同的成分（多粘菌素a、b、c、d、e），现仅多粘菌素b和e应用于临床，其对大多数革兰氏阴性菌都具有显著的体外活性，但由于其严重的神经、肾毒性而未被广泛应用。近年来，由于多药耐药大肠杆菌感染广泛流行，多粘菌素俨然成为最后的药物选择[7]，但是伴随多粘菌素的逐步应用，有研究表明在用药猪和禽类粪便中也分离出了对多粘菌素耐药的大肠杆菌[8-15]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：
明确pmrb基因在多粘菌素类抗生素耐药中的作用。
3. 研究的方法与方案
研究方法：
1 通过浓度梯度法诱导临床分离的多粘菌素敏感株为耐药株，通过体外抑菌实验来评价其敏感或耐药性；
2 通过连接t载体测序的方法来确保测序的准确性，用mega软件比对分析耐药菌与敏感菌序列，找出突变位点。
4. 研究创新点
特色或创新之处
由于抗生素滥用所导致的大肠杆菌多药耐药、泛耐药菌株的出现俨然成为当今医学临床治疗的难题，特别是近几年来大肠杆菌对多粘菌素类药物的耐药的产生，使人类的健康面临着巨大的威胁，弄清楚大肠杆菌对于多粘菌素类药物的耐药机制是解决所面临问题的有效途径，本实验在已有科学研究的基础上，创新的利用同源重组的方法来验证PmrB基因在大肠杆菌对多粘菌素类药物耐药中的作用，从而更好地理解大肠杆菌耐药性的发生机制和传播规律，为制定阻遏细菌耐药性上升趋势的合理策略提供理论基础，具有重要的现实意义。
5. 研究计划与进展
研究计划及预期进展
2015.09-2015.10 查找相关文献，学习相关试验技能，制定试验计划
2015.10-2015.11 检测实验室现存大肠杆菌中的多粘菌素类耐药基因
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