多粘类芽孢杆菌NSY50通过调控根际微生物群落抑制黄瓜枯萎病开题报告

1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）

本课题的意义：黄瓜枯萎病是一种土传真菌病害，病原菌能够长期存在土壤中，基于生物防治的安全、高效、环保等优点以及人们对绿色食品的要求，采用根际促生菌来实现对黄瓜枯萎病的生物防治方法具有广阔的市场前景。

植物根际发生着复杂的生物、生态过程，而微生物在根际环境中起到非常重要的作用，决定了植物的健康生长。

本研究采用高通量测序对根际土壤的细菌和真菌群落进行分析，探究多粘类芽孢杆菌nsy50提高黄瓜抵御枯萎病侵害能力、缓解病菌伤害的作用机制，为设施黄瓜栽培抗病促长提供理论依据和实践基础。

2. 研究的基本内容和问题

研究目标： i）评估多粘类芽孢杆菌nsy50对于抑制黄瓜枯萎病的效果； ii）比较不同处理下根际不同微生物群落组成； iii）探究关于土壤微生物群落和环境因子的相关性对于抑制枯萎病的影响。

研究内容：在本研究中，通过盆栽试验评估接种nsy50对黄瓜枯萎病菌的抑制效果和对生长的影响，并采用miseq测序技术对16s rrna和its序列进行分析来探究接种nsy50对土壤微生物群落组成的影响，以及结合土壤环境因子（土壤酶活和土壤理化性质），探究与枯萎病的潜在相关性。

拟解决的关键问题：探究nsy50对黄瓜枯萎病菌的抑制效果和对植物生长的影响。

3. 研究的方法与方案

1、试验材料：津春2号黄瓜，易感病品种。

2、菌株：多粘类芽孢杆菌nsy50；枯萎病菌: foc。

3、试验设计：①ck ② nsy50：2.5 10^8 (cfu)/ml③ foc：1.0 10^7 (cfu)/ml④nsy50 foc：nsy50预处理3天后接种foc光培箱栽培（泥炭：蛭石=2:1，v/v），评估接foc后30天的发病状况，并且取第30天的根际土壤用于各项指标测定。

4. 研究创新点

运用生物防治手段防治土传病害，与以往常用农药的化学防治从防治手段的性质上有根本不同，其优越性和与之相比的劣势（见效慢等）同样存在，但确也是本研究的特色之处。

5. 研究计划与进展

研究计划：评估黄瓜生长和病情抑制能力、序列结果、微生物多样性分析、主成分分析（PCA分析）和层次聚类分析、微生物群落组成和结构分析、土壤环境因子分析等。

预期进展：已经完成了以上相关实验，得出相应数据，继续进行数据分析与总结，开始撰写毕业论文。